Молодежный инновационный вестникМолодежный инновационный вестник2415-7805Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Воронежский государственный медицинский университет имени Н.Н. Бурденко" Министерства здравоохранения Российской Федерации8656Conference ProceedingsEVALUATION OF THE IMPACT OF THE INHIBITOR OF Γ-SECRETASE ON THE POLARIZATION OF IMMUN RESPONSE IN PULMONARY TUBERCULOSISSaninaAlina Evgenievnaalbe4303@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9261-635XSerebryakovaValentina Aleksandrovnaserebryakova-val@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0001-7078-4988UrazovaOlga Ivanovnaurazova72@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9457-8879Siberian State Medical University290320231211391400504202308062023Copyright © 2023, Sanina A.E., Serebryakova V.A., Urazova O.I.2023<p style="text-align: justify;"><span data-contrast="auto">The relevance of the study is due to the need to search for pathogenetic agents that can increase the effectiveness of tuberculosis treatment. In the course of the work, the significance of the Notch signaling pathway in the pathogenesis of drug-susceptible and drug-resistant pulmonary tuberculosis was established. Modulating effect of gamma-secretase inhibitor (DAPT N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester N-[N-(3,5-difluorophenacetyl)-L- alanyl]-S-phenylglycine tert-butyl ether) on Notch-mediated differentiation of Th1- and Th2-lymphocytes allows us to consider this signaling pathway as a possible targeted target for the pathogenetic therapy of pulmonary tuberculosis.</span><span data-ccp-props="{201341983:0,335551550:1,335551620:1,335559739:160,335559740:259}"></span></p>pulmonary tuberculosisNotch signaling pathwayimmunityT-lymphocytesтуберкулез легкихNotch сигнальный путьиммунитетТ-лимфоциты<p style="text-align: justify;"><strong>Актуальность. </strong>В качестве одного из факторов неэффективности антигенспецифического иммунного ответа при туберкулезе легких рассматривается иммунный дисбаланс с Th2-поляризацией иммунного ответа. Семейство рецепторов Notch является важным модулятором дифференцировки и активации эффекторной функции Т-клеток. В функционировании сигнального каскада ключевая роль принадлежит ферменту -секретазе, который с помощью протеолитического высвобождения внутриклеточного домена рецептора NICD влияет на активацию транскрипции генов-мишеней, регулирующих дифференцировку клеток. Одним из известных ингибиторов -секретазы является DAPT N-[N-(3,5-Difluorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester N-[N-(3,5- дифторфенацетил)-L-аланил]-S-фенилглицин трет-бутиловый эфир).</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Цель исследования. </strong>Установить роль ингибитора -секретазы (DAPT) в модуляции дифференцировки Th1- и Th2-лимфоцитов при туберкулезе легких (ТЛ).</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Материалы и методы. </strong>В исследование вошло 15 больных (средний возраст 45,46,58 лет) с впервые выявленным ТЛ, выделяющих микобактерии, чувствительные к основным противотуберкулезным средствам (ЛЧ, 8 человек) и устойчивые как минимум к изониазиду и рифампицину (ЛУ, 7 пациентов). Контрольную группу составили 8 здоровых доноров. Мононуклеарные лейкоциты выделяли из крови методом градиентного центрифугирования. В среду для инкубации вносили антигены (АГ) CFP10-ESAT6 (Диаскинтест, Generium, Россия) в дозе 10 мкг/мл или ингибитор -секретазы (DAPT, Tocris Bioscience, Великобритания) в дозе 10 мкМ/л в комбинации с АГ. Клетки культивировали в полной питательной среде при 37^оС и 5% СО₂ в течение 72 ч. Содержание Th1- и Th2-лимфоцитов оценивали путем определения экспрессии рецептора CD4 (FITC, BD Biosciences, США) и внутриклеточных транскрипционных факторов T-bet (Alexa Fluor 405, RD Systems Inc, США), GATA-3 (PerCP-eFluor 710, BD Biosciences, США) методом проточной цитофлуориметрии. Статистическая обработка проводилась с помощью пакета программ IBM SPSS Statistics 20.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Результаты. </strong>Установлено, что относительное количество Th1 (CD4⁺T-bet⁺) и Th2 (CD4⁺GATA-3⁺) лимфоцитов в группах с ЛЧ и ЛУ ТЛ превышало их содержание у здоровых добровольцев в среднем в 1,8 и 2,4 раза соответственно (р0,001). У больных ЛУ ТЛ количество Th1-лимфоцитов было ниже (р=0,005), а число Th2-клеток выше (р=0,035), чем у пациентов с ЛЧ ТЛ. После стимуляции культур клеток АГ регистрировалось увеличение числа клеток, экспрессирующих CD4⁺T-bet⁺и CD4⁺GATA-3⁺, относительно исходных значений во всех группах обследуемых. Добавление в инкубационную среду DAPT и АГ у больных ЛЧ и ЛУ ТЛ приводило к статистически значимому повышению количества Th1-лимфоцитов, и напротив, снижению числа Th2-клеток по сравнению с соответствующими показателями при стимуляции АГ.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Вывод. </strong>Иингибитор -секретазы (DAPT) оказывает модулирующее действие на дифференцировку Т-лимфоцитов у больных туберкулезом легких. В концентрации 10 мкМ/л DAPT способствует дифференцировке Th1-клеток и уменьшает количество Тh2-лимфоцитов.</p>