Association between parameters of clinical blood analysis and relative light sum of chemiluminescence of whole blood in iron-deficency anemia and pulmonary, stomach and liver diseases

Full Text

 АКТУАЛЬНОСТЬ 

Проблема железодефицитной анемии и заболеваний дыхательной системы, желудка и печени является актуальной в Тюменской области, ХМАО и ЯНАО. По данным Росстата, в 2018 году в указанных регионах количество людей, у которых впервые были зарегистрированы болезни крови, кроветворных органов и отдельные нарушения, вовлекающие иммунный механизм, снизилось по сравнению с 2017 годом примерно в 1,19 раза. Однако заболеваемость болезнями органов дыхания в течение того же периода возросла в 1,10 раза, а заболеваемость болезнями органов пищеварения — в 1,09 раза.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ 

Установить наличие ассоциации параметров общего анализа крови (гематокрита и процента нейтрофилов) и относительной светосуммы хемилюминесценции цельной крови при железодефицитной анемии и заболеваниях дыхательной системы, желудка и печени.

Методы.  

Дизайн исследования.

Их всех параметров общего анализа крови в качестве исследуемых выбрали гематокрит и процент нейтрофилов.

Гематокрит отражает общее количество форменных элементов крови. В них находится подавляющая часть липидов крови, дающих хемилюминесценцию [3].

Процент нейтрофилов характеризует взаимодействие иммунной системы с антигенами во время патологий, в частности инфекционных. Изменение относительной светосуммы нейтрофилов связано с развитием «респираторного взрыва» — процесса увеличения генерации активных форм кислорода (АФК), который происходит в клетках при фагоцитозе и регуляторных воздействиях [4].

В исследование включили 154 пациента ГБУЗ ТО «Областная клиническая больница №1» (г. Тюмень): 104 человека с патологиями, указанными в цели исследования, и 50 здоровых добровольцев, составивших контрольную группу.

Критерии соответствия. Критериями включения пациентов в исследование являлось наличие:

— пневмонии, вызванной Streptococcus pneumoniae, и пневмонии при болезнях, классифицированных в других рубриках (J12 и J17*);

— острого или хронического бронхита (J20 или J40–J42);

— бронхиальной астмы или астматического состояния (J45–J46);

— гастрита и дуоденита (K29);

— хронического вирусного гепатита (B18);

— железодефицитной анемии (D50).

Критериями исключения больных из исследования являлись:

— наличие в анамнезе патологий сердечно-сосудистой, дыхательной, гепатобилиарной систем, желудочно-кишечного тракта и системы крови (за исключением исследуемых);

— наличие в анамнезе состояний гиперчувствительности (кроме тех состояний, которые связаны с исследуемыми патологиями);

— наличие в анамнезе инфекций;

— наличие в анамнезе онкологий;

— наличие беременности;

— отказ от участия в исследовании.

Условия проведения 

Измерение параметров общего анализа крови провели на клинической базе ОКБ №1 (г. Тюмень).

Хемилюминесценцию цельной крови исследовали на базе лаборатории биофизических методов исследования (кафедра анатомии и физиологии человека и животных) Тюменского государственного университета.  

Продолжительность исследования 

1 месяц (июнь–июль 2019 года).  

Описание медицинского вмешательства 

Кровь объемом 75 мкл брали из локтевой вены на 1 сутки.  

Основной исход исследования 

Цель исследования достигнута только благодаря адекватному забору исследуемой крови и при соблюдении правил её транспортировки. 

Методы регистрации исходов 

Гематокрит определили методом микроцентрифугирования.

Процент нейтрофилов определили на гематологическом анализаторе XT-2000i путем соотношения нейтрофилов к общему количеству лейкоцитов.

Светосумму хемилюминесценции кровь объемом 75 мкл добавили к 2 мл раствора люминола концентрацией 8 . 10^-4 М в растворе NaCl 0,9 н. объемом 2 мкл.

Значение относительной светосуммы хемилюминесценции рассчитали по формуле:

Относительная светосумма хемилюминесценции =       светосумма хемилюминесценции пробы крови / светосумма хемилюминесценции раствора NaCl 0,9 н.

Значение

Статистический анализ 

Размер выборки предварительно не рассчитывался.

Для статистического анализа данных применяли пакет программ Statistica 6.0 (StatSoft, США).

Статистические различия между изучаемыми группами определяли при помощи t-критерия Стьюдента. Для оценки влияния параметров общего анализа крови на значение относительной светосуммы хемилюминесценции цельной крови использовали регрессионный анализ с помощью β-коэффициентов.  

Результаты. 

Объекты (участники) исследования: 

В исследовании участвовали:

— 6 пациентов с пневмонией (4 мужчины и 2 женщины, возраст от 33 до 67 лет);

— 16 пациентов с бронхитом (10 мужчин и 6 женщин, возраст от 29 до 69 лет);

— 16 пациентов с бронхиальной астмой (10 мужчин и 6 женщин, возраст от 39 до 67 лет);

— 36 пациентов с гастритом (22 мужчины и 14 женщин, возраст от 30 до 69 лет);

— 6 пациентов с хроническим вирусным гепатитом (4 мужчины и 2 женщины, возраст от 29 до 63 лет);

— 24 пациента с железодефицитной анемией (13 мужчин и 11 женщин, возраст от 31 до 69 лет).

Контрольную группу составили 50 здоровых добровольцев (30 мужчин и 20 женщин, возраст от 29 до 69 лет).

Диагноз был поставлен на основании анамнеза.  

Основные результаты исследования.  

У всех групп больных значения относительной светосуммы хемилюминесценции цельной крови выше, чем в контрольной группе, особенно при хроническом вирусном гепатите.  

В контрольной группе мы наблюдаем значение относительной светосуммы хемилюминесценции цельной крови 0,508±0,324 условных единиц (усл. ед.).  

В результате исследования были получены следующие значения относительной светосуммы хемилюминесценции:

– при железодефицитной анемии — 0,657±0,180 усл. ед.;

– при гастрите — 0,839±0,231 усл. ед.;

– при пневмонии — 0,850±0,213 усл. ед.;

– при бронхиальной астме — 0,949±0,687 усл. ед.;

– при бронхите —0,978±0,304 усл. ед.  

Самый большой показатель относительной светосуммы хемилюминесценции наблюдается у больных хроническим вирусным гепатитом (1,014±0,099 усл. ед.).  

Модули β-коэффицентов регрессии, связывающие значения относительной светосуммы хемилюминесценции цельной крови и параметры общего анализа крови, равны:  

– у пациентов с железодефицитной анемией — 0,106767±0,220152 (связь с процентом нейтрофилов) и -0,095342±0,221103 (связь с гематокритом); 

– у пациентов с гастритом — 0,060883±0,176452 (связь с гематокритом) и 0,058291±1,584365 (связь с процентом нейтрофилов); 

– у пациентов с пневмонией —-0,090379±0,826169 (связь с процентом нейтрофилов) и 0,058291±1,584365 (связь с гематокритом); 

– у больных бронхиальной астмой — -0,180249±0,279995 (связь с процентом нейтрофилов) и -0,111679±0,282082 (связь с гематокритом); 

– у больных бронхитом — 0,407263±0,255874 (связь с гематокритом) и 0,058513±0,255603 (связь с процентом нейтрофилов). 

У больных хроническим вирусным гепатитом значение относительной светосуммы хемилюминесценции цельной крови связано с процентом нейтрофилов, о чем свидетельствует модуль β-коэффициента регрессии (0,627121±0,432653). Однако статистически достоверная разница между процентом нейтрофилов (NEU) у людей с хроническим вирусным гепатитом (среднее значение NEU = 61,73±15,51 %) и таковым у клинически здоровых людей (среднее значение NEU = 62,83±13,14 %) отсутствует. Поэтому стоит сделать вывод о том, что значение относительной светосуммы хемилюминесценции связано с гематокритом.

Модуль β-коэффициента регрессии между относительной светосуммой хемилюминесценции и гематокритом составляет -0,426045±0,417039. 

Нежелательные явления

В ходе исследования нежелательных явлений выявлено не было.

ОБСУЖДЕНИЕ 

Изменение параметров гемостаза, в частности значительное снижение гематокрита, являются одним из маркеров развития воспаления в печени [1, 2]. Кроме того, исследования на собаках, проведенные Ватниковым Ю.А. с соавт. (2018), показали, что во время хронического вирусного гепатита увеличивается число макроцитов, для формирования которых требуется большое количество липидов [5]. 

Можно предположить, что повышение содержания липидов в крови приводит к увеличению вероятности перекисного окисления липидов.  

ЗАКЛЮЧЕНИЕ 

При всех изученных нами патологиях наблюдается достоверное увеличение интенсивности процессов пероксидации липидов, которые приводят к изменению гематокрита и процента нейтрофилов. 

В результате исследования мы выяснили, что самое большое значение относительной светосуммы хемилюминесценции цельной крови отмечается у больных хроническим вирусным гепатитом, так как при патологии возрастает число макроцитов. 

About the authors

Olga Puzikova

Author for correspondence.
Email: olga.puzikova1997@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-4107-990X
SPIN-code: 9138-7292
Russian Federation, 3 Pirogova Street, 625043 Tyumen

References