Прикладные информационные аспекты медицины

2070-9277

Voronezh State Medical University named after N.N. Burdenko - The State Budgetary Institution of Higher Professional Education «Voronezh State Medical University named after N.N. Burdenko» of the Ministry of Public Health of the Russian

10754

10.18499/2070-9277-2025-28-1-109-118

Investigation of the antioxidant activity of horse chestnut flowers in various growing regions by differential spectrophotometry

Dunilin

Alexander Denisovich

Postgraduate student of the Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosyad.dunilin@gmail.comTrineeva

Olga Valeryevna

Doctor of Pharmacy, Head of the Department of Pharmaceutical Chemistry and Pharmacognosytrineevaov@mail.ruLarina

Alexandra Olegovna

studenta.l.lar@mail.ruDavidov

Ivan Vyacheslav

studentidavydov1118@gmail.com

VSU Federal State Budgetary Educational Institution

30032025

281109118

21032025

2025

The article presents the results of determining the total content of antioxidant substances in terms of ascorbic acid and the total antioxidant activity of horse chestnut flowers harvested in various regions of the Russian Federation, using the differential spectrophotometry method. The highest antioxidant activity values were observed in the raw materials harvested in the southern (Stavropol Krai (1,213610-5 g/ml; 0,20420.0141%) and Volgograd Oblast (1,205110-5 g/ml; 0,19980.0138%) and northern regions (Leningrad Oblast (1,113410-5 g/ml; 0,18880,0130%)). The differences obtained may be due to the influence of climatic conditions on the biochemical composition of the studied raw materials. It was established that the actual concentration of vitamin C in chestnut flowers is relatively low, which suggests that the antioxidant effect is due not only to ascorbic acid, but also to a complex of other biologically active compounds. As part of the assessment of possible areas of use of horse chestnut flowers in pharmacy and medicine, It was established that in the infusion, as a potential medicinal form based on raw materials, the total content of substances that prevent oxidation, expressed in ascorbic acid equivalent, was 7,10 mg%. The study of the antioxidant activity of other possible medicinal forms (liquid and dry extracts) is a further prospect for developing the research topic.

Horse chestnut, horse chestnut flowers, Aesculus hippocastanum L., differential spectrophotometry, antioxidant activity, reducing substances

Каштан конский, цветки каштана конского, дифференциальная спектрофотометрия, антиокислительная активность, вещества восстановители

Актуальность. Уникальным природным источником БАВ, необходимых для поддержания нормальной работы функциональных систем организма человека, являются лекарственные растения. Комплекс фитокомпонентов, включающий в себя витамины, полисахариды и в том числе простые сахара, органические кислоты, каротиноиды, полифенольные соединения, такие как: флавоноиды, оксикоричные кислоты, антоцианы, лигнаны и дубильные вещества, обладают мощной антиокислительной активностью и значительным потенциалом в борьбе с активными формами кислорода [1, 2]. Многие из этих фитонутриентов не могут быть биосинтезированы организмом человека и поступают в него с растительной пищей или пищевыми добавками. Лекарственные растения, содержащие данные группы БАВ и препараты на их основе зарекомендовали себя как эффективные и малотоксичные средства в борьбе с целым рядом заболеваний, индуцированных окислительным стрессом, в том числе возраст-ассоциированных [3, 4]. Низкомолекулярные соединения наряду с пулом специализированных ферментов формируют антиоксидантную систему самих растений, необходимую для нейтрализации активных форм кислорода (АФК) и защиты клеток от окислительного стресса [5-8]. Подобная система является эволюционным механизмом адаптации растений к экстремальным условиям окружающей среды, позволяющая приспосабливаться к различным неблагоприятным факторам. Для оценки антиокислительной и антирадикальной активности лекарственного растительного сырья (ЛРС) применяются различные титриметрические, электрохимические, спектральные и другие методы [9-15]. Каштан конский обыкновенный (Aesculus hippocastanum L.), принадлежащий к семейству конскокаштановые (Hippocastanaceae), представляет собой перспективный объект для создания лекарственных препаратов, не только на основе семян, но и других морфологических органах растения, которые потенциально могут обладать антиоксидантным, капилляропротекторным, противовоспалительным и венотонизирующим действием [16, 17]. Согласно данным ряда авторов, экстракты на основе семян каштана конского обладают довольно выраженной антиоксидантной активностью [18, 19]. По некоторым данным среди надземных органов растения наиболее высокую антиоксидантную активность показал экстракт коры каштана конского [20]. Однако, на сегодняшний день, в научном поле наблюдается небольшое количество работ, посвященных изучению антиокислительной активности цветков каштана конского. Несмотря на растущий интерес к природным антиоксидантам и достаточное количество методик для оценки антиокислительной активности растительного сырья, данный аспект остается недостаточно изученным, что подчеркивает актуальность дальнейших исследований данного лекарственного растительного сырья (ЛРС). Целью работы являлось сравнительное изучение антиокислительной активности цветков каштана конского различных регионов произрастания методом дифференциальной спектрофотометрии. Материал и методы исследования. Объектом исследования служили высушенные воздушно-теневым методом цветки каштана конского обыкновенного, заготовленные в Петрозаводском городском округе (61.84501 с.ш. 34.39094 в.д.), Ленинградской (59.75432 с.ш., 30.19781 в.д.), Московской (55.502041 с.ш., 37.800805 в.д.), Воронежской (51.834028 с.ш., 39.382854 в.д.), Волгоградской (48.58188 с.ш., 44.67911 в.д.) областях и Ставропольском крае (44.0755 с.ш., 43.01117 в.д.) во время цветения в 2023 году. Выбор регионов заготовки сырья был обусловлен естественным ареалом культивирования данного растения, а также необходимостью оценки влияния совокупности природных факторов окружающей среды на антиокислительную активность сырья. Оценку антиокислительной активности проводили в соответствии с известной спектрофотометрической методикой [21], основанной на взаимодействии извлечения из ЛРС, содержащего БАВ-восстановители с растворами медиаторной системы, состоящей из 0,002 М раствора ферроцианида калия и 0,002 М раствора феррицианида калия, взятых в соотношении 1:1. Под действием БАВ, способных восстанавливать Fe3+ в Fe2+, происходит снижение содержания в растворе [Fe(CN)6]3- и рост концентрации [Fe(CN)6]4-, что сопровождается гипохромным смещением максимума поглощения при длине волны 420 нм на спектре поглощения медиаторной пары (рис. 1). Способ позволяет проводить оценку антиокислительной активности ЛРС и суммарного содержания в нем БАВ-антиокислителей в пересчете на кислоту аскорбиновую и стандартизировать ЛРС по содержанию данных БАВ. Методика отличается достаточной чувствительностью (110-5 г/мл), экономичностью, доступностью и экспрессностью. Извлечение из исследуемого ЛРС готовили в соответствии с описанной методикой [21]. Рис. 1. Спектр поглощения медиаторной пары до и после добавления извлечений из цветков каштана конского Статистическую обработку результатов проводили по ОФС.1.1.0013 ГФ РФ XV изд. Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний [22]. Настой цветков каштана конского изготавливали в соответствии с ОФС.1.4.1.0018 ГФ РФ XV изд. Настои и отвары [22]. Полученные результаты и их обсуждение. На первом этапе работы были установлены области линейности методики и построен калибровочный график, демонстрирующий обратно пропорциональную зависимость величины оптической плотности раствора медиаторной пары от концентрации добавленного стандартного раствора аскорбиновой кислоты (рис. 2). Рис. 2. Калибровочные графики: а область концентрации аскорбиновой кислоты от 0,01 до 1 г/мл 10-5, б область концентрации аскорбиновой кислоты от 1 до 10 г/мл 10-5 График характеризовался наличием точки перегиба и был разделен на 2 участка с коэффициентами корреляции в каждом (R20,99). На следующем этапе работы проводили определение антиокислительной активности цветков каштана конского различных регионов произрастания в соответствии с методикой, описанной в патенте №2712069 C2 от 24.01.2020 [21]. Вид спектров поглощения медиаторной пары при взаимодействии с БАВ-восстановителями, содержащимися в цветках каштана конского различных регионов произрастания представлен на рис. 3. Рис. 3. Спектр поглощения извлечений из цветков каштана конского различных регионов произрастания в присутствии медиаторной пары [Fe(CN)6]3- и рост концентрации [Fe(CN)6]4- Отталкиваясь от полученных значений оптической плотности раствора медиаторной пары после добавления извлечений из сырья, для расчетов использовали калибровочный график в диапазоне низких концентраций аскорбиновой кислоты. При помощи уравнения градуировочной зависимости (рис. 2), вычислили антиокислительную активность извлечения в пересчете на кислоту аскорбиновую в г/мл раствора по формуле: (1) где А - оптическая плотность исследуемого раствора в максимуме поглощения. Суммарное содержание БАВ-антиокислителей в сырье в пересчете на кислоту аскорбиновую и абсолютно сухое сырье вычисляли по формуле: (2) где АОА - вычисленная ранее по формуле 1, г/мл; - потеря в массе при высушивании исследуемого сырья, %; а - точная навеска сырья Результаты определения антиокислительной активности цветков конского каштана представлены в таблице 1. Таблица 1 Антиокислительная активность и суммарное содержание БАВ антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту и абсолютно сухое сырье <table> <tbody> <tr> <td width="153"> Регион произрастания </td> <td width="121"> Антиокислительная активность, г/мл </td> <td width="188"> Сумма антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту и абсолютно сухое сырье, % </td> <td width="150"> Содержание аскорбиновой кислоты (фармакопейный метод) [22] </td> </tr> <tr> <td width="153"> Петрозаводский городской округ </td> <td width="121"> 1,000510-5 </td> <td width="188"> 0,16980,0117 </td> <td width="150"> 0,04380,0032 </td> </tr> <tr> <td width="153"> Ленинградская область </td> <td width="121"> 1,113410-5 </td> <td width="188"> 0,18880,0130 </td> <td width="150"> 0,04680,0034 </td> </tr> <tr> <td width="153"> Московская область </td> <td width="121"> 0,768910-5 </td> <td width="188"> 0,13050,0090 </td> <td width="150"> 0,04730,0035 </td> </tr> <tr> <td width="153"> Воронежская область </td> <td width="121"> 0,942710-5 </td> <td width="188"> 0,15780,0109 </td> <td width="150"> 0,04760,0035 </td> </tr> <tr> <td width="153"> Волгоградская область </td> <td width="121"> 1,205110-5 </td> <td width="188"> 0,19980,0138 </td> <td width="150"> 0,04210,0030 </td> </tr> <tr> <td width="153"> Ставропольский край </td> <td width="121"> 1,213610-5 </td> <td width="188"> 0,20420,0141 </td> <td width="150"> 0,40000,0030 </td> </tr> </tbody> </table> Результаты статистической обработки экспериментально полученных данных на примере цветков каштана конского, заготовленных на территории Воронежской области приведены в таблице 2. Таблица 2 Метрологическая характеристика результатов количественного определения суммы антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту в цветках каштана конского (P = 95 %; n = 5) <table width="95%"> <tbody> <tr> <td width="10%"> Xср </td> <td width="13%"> S2 </td> <td width="13%"> S </td> <td width="14%"> Sxср </td> <td width="13%"> ∆X </td> <td width="13%"> ∆Xср </td> <td width="9%"> , % </td> <td width="10%"> ср, % </td> </tr> <tr> <td width="10%"> 0,0712 </td> <td width="13%"> 0,000015 </td> <td width="13%"> 0,003955 </td> <td width="14%"> 0,001766 </td> <td width="13%"> 0,010995 </td> <td width="13%"> 0,004908 </td> <td width="9%"> 15,44 </td> <td width="10%"> 6,89 </td> </tr> </tbody> </table> Наибольшее содержание антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту наблюдали в сырье из Ставропольского края (1,213610-5 г/мл; 0,20420,0141%), Волгоградской (1,205110-5 г/мл; 0,19980,0138%) и Ленинградской областей (1,113410-5 г/мл; 0,18880,0130%). Самая низкая антиокислительная активность зафиксирована для извлечений из сырья, заготовленного в Московской области (0,768910-5 г/мл), что почти в 1,6 раза меньше, чем в Ставропольском крае. Содержание суммы антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту в данном регионе составило (0,13050,0090%), что на 35% меньше, чем в лидирующих регионах. Более высокие показатели антиокислительной активности извлечений из цветков каштана, произрастающих в самых южных (Ставропольский край и Волгоградская область) и самых северных (Ленинградская область) из наблюдаемых областей, могут быть связаны с неблагоприятными условиями (по сравнению с регионами средний полосы России). Экстремальные факторы (засушливость, низкие среднегодовые температуры и качество почв) стимулируют растения к синтезу защитных соединений, таких как полифенолы, каротиноиды, витамины, обладающих антиокислительными свойствами. Оценивая влияние фактора антропогенной нагрузки, можно также сказать, что эти регионы менее урбанизированы, что создает более благоприятные условия для роста растений и накопления вторичных метаболитов. ЛРС из Московской области демонстрирует самые низкие показатели содержания веществ, препятствующих окислению, что, вероятно, обусловлено значительным экологическим давлением, вызванным деятельностью человека. Климат региона умеренный, однако загрязнение воздуха, почвы и воды, вызванное промышленными выбросами, транспортной нагрузкой и высокой плотностью населения, негативно влияет на способность растений синтезировать антиоксиданты. Почвы в этом регионе могут быть загрязнены тяжелыми металлами и другими токсичными веществами, что угнетает метаболизм растений и снижает их антиоксидантный потенциал. Дополнительным фактором может выступать эффект избыточного увлажнения почвы, который снижает активность ферментных систем, участвующих в синтезе антиоксидантов. В сочетании с другими факторами это может объяснять низкие показатели антиокислительной активности сырья, заготовленного в Московской области. Для оценки вклада содержания аскорбиновой кислоты в полученные значения антиокислительной активности, являющейся суммой активностей различных групп БАВ восстановительного характера, присутствующих в одном извлечении, было установлено содержание аскорбиновой кислоты в цветках каштана конского различных регионов произрастания, с использованием титриметрической методики, представленной в ФС.2.5.0106.18 ГФ РФ XV изд. Шиповника плоды [22]. Все изучаемые регионы показали приблизительно равное содержание витамина С. Исходя из полученных данных, следует, что антиокислительный эффект извлечений обусловлен не только аскорбиновой кислотой, но и другими группами БАВ, такими как флавоноиды, фенолокислоты, каротиноиды, сахара и дубильные вещества. Кроме того, различные антиокислители обладают синергизмом. Например, аскорбиновая кислота может восстанавливать окисленные формы других антиокислителей, таких как витамин Е или флавоноиды, что повышает общую антиокислительную активность. На следующем этапе исследования для оценки перспективности применения данного сырья в качестве источника антиокислителей и целесообразности разработки на его основе лекарственных растительных препаратов (ЛРП) для профилактики и коррекции последствий оксидативного стресса проведен сравнительный анализ антиокислительной активности цветков каштана (на примере сырья, заготовленного в Воронежской области) с другими фармакопейными видами ЛРС. Для сравнения были выбраны листья крапивы двудомной (Urtica dioica L.) и плоды облепихи крушиновидной (Hippophae rhamnoides L.), как известные источники БАВ-восстановителей фенольных соединений, витаминов и каротиноидов [21]. Полученные количественные данные представлены в таблице 3. Исходя из сравнительного анализа, можно предположить, что цветки каштана конского обладают умеренной антиокислительной активностью, сравнимой с плодами облепихи крушиновидной. Настой, как лекарственная форма, характеризуется простотой и быстротой приготовления, что делает его удобным для использования в бытовых условиях. Поэтому на завершающем этапе данного исследования была проведена также количественная оценка содержания веществ антиокислителей в настое цветков каштана конского. Выбор лекарственной формы обусловлен перспективой использования цветков каштана в качестве ЛРС в пачках и фильтр-пакетах, а также в составе сборов. Таблица 3 Антиокислительная активность и суммарное содержание БАВ антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту и абсолютно сухое сырье в цветках различных фармакопейных видах сырья <table> <tbody> <tr> <td width="208"> Растительное сырье </td> <td width="190"> Антиокислительная активность, г/мл </td> <td width="226"> Сумма антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту и абсолютно сухое сырье, % </td> </tr> <tr> <td width="208"> Цветки каштана конского </td> <td width="190"> 0,942710-5 </td> <td width="226"> 0,15780,0109 </td> </tr> <tr> <td width="208"> Листья крапивы двудомной </td> <td width="190"> 1,577610-5 </td> <td width="226"> 0,26910,0271 </td> </tr> <tr> <td width="208"> Плоды облепихи крушиновидной </td> <td width="190"> 0,915410-5 </td> <td width="226"> 0,33810,0340 </td> </tr> </tbody> </table> Установлено, что содержание суммы БАВ-антиокислителей в пересчете на эквивалент аскорбиновой кислоты в лекарственной форме составило 7,10 мг%. Данные свидетельствуют о дополнительном обогащении рациона питания человека витамином С при приеме настоя внутрь, однако, не позволяют рассматривать в качестве его единственного источника в соответствии с рекомендуемыми нормативами потребления [23]. Выводы. Методом дифференциальной спектрофотометрии проведено определение антиокислительной активности извлечений из цветков каштана конского, заготовленных в различных регионах произрастания РФ и установлено суммарное содержание веществ-антиокислителей в пересчете на аскорбиновую кислоту и абсолютно сухое сырье. Наибольшие показатели были характерны для сырья из Ставропольского края (1,213610-5 г/мл; 0,20420,0141%), Волгоградской (1,205110-5 г/мл; 0,19980,0138%) и Ленинградской областей (1,113410-5 г/мл; 0,18880,0130%). Полученные различия могут быть обусловлены влиянием климатических условий на биохимический состав исследуемого сырья. Оценка вклада содержания аскорбиновой кислоты в полученные значения антиокислительной активности, являющейся суммой активностей различных групп БАВ восстановительного характера, присутствующих в одном извлечении, показал, что антиокислительный эффект обусловлен не только аскорбиновой кислотой, но и комплексом других биологически активных соединений. Установлено, что фактическая концентрация витамина С в цветках каштана является относительно низкой по сравнению с фармакопейными источниками. Сравнительный анализ антиокислительной активности цветков каштана конского, заготовленных в Воронежской области, с аналогичными показателями для фармакопейных видов ЛРС Urticae dioicae folia (крапивы двудомной листья) и Hippophaes rhamnoides fructus (облепихи крушиновидной плоды) позволил установить, что цветки каштана конского характеризуются умеренной антиокислительной активностью. В рамках оценки возможных направлений использования цветков каштана конского в фармации и медицине было установлено, что в настое, как потенциальной лекарственной форме на основе сырья, суммарное содержание веществ, препятствующих окислению, выраженное в эквиваленте аскорбиновой кислоты, составило 7,10 мг%. Исследование антиокислительной активности других возможных лекарственных форм (настоек, жидких и сухих экстрактов) является дальнейшей перспективой разработки тематики исследования.

1. Определение некоторых биологически активных веществ в листьях облепихи крушиновидной титриметрическими методами / Н. А. Ковалева, О. В. Тринеева, И. В. Чувикова [и др.] // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. – 2023. – № 2. – С. 97-102.

2. Тринеева, О. В. Профиль биологически активных веществ листьев аронии Мичурина, произрастающей в условиях Центрального Черноземья / О. В. Тринеева, О. В. Пугачева // Разработка и регистрация лекарственных средств. – 2024. – Т. 13, № 2. – С. 48-58. – DOI 10.33380/2305-2066-2024-13-2-1715.

3. Полифенолы как перспективные биологически активные соединения / Т. Н. Бобрышева, Г. С. Анисимов, М. С. Золоторева [и др.] // Вопросы питания. – 2023. – Т. 92, № 1(545). – С. 92-107. – DOI 10.33029/0042-8833-2023-92-1-92-107.

4. Сухомлинов, Ю. А. Изучение антиоксидантной активности травы чины клубненосной (Lathyrus tuberosus L.) / Ю. А. Сухомлинов, К. Р. Бубенчикова // Человек и его здоровье. – 2022. – Т. 25, № 3. – С. 93-98. – DOI 10.21626/vestnik/2022-3/10.

5. Боярских, И. Г. Изменение индивидуально-группового состава полифенолов в листьях растений Lonicera caerulea subsp. Altaica (Caprifoliaceae) в высотном градиенте / И. Г. Боярских, В. А. Костикова // Химия растительного сырья. – 2024. – № 1. – С. 186-194. – DOI 10.14258/jcprm.20240112977.

6. Theocharis A., Clement Ch., Barka E.A. Physiological and molecular changes in plants grown at low temperature. Planta. 2012. Vol. 235. P. 1091-1105.

7. Nagahama N., Gastaldi B., Clifford M.N., Manifesto M.M., Fortunato R.H. The influence of environmental variations on the phenolic compound profiles and antioxidant activity of two medicinal Patagonian valerians (Valeriana carnosa Sm. and V. clarionifolia Phil.) // AIMS Agriculture and Food. 2021. Vol. 6, no. 1. Pp. 106-124. DOI: 10.3934/agrfood.2021007.

8. Ni Q., Wang Z., Xu G., Gao Q., Yang D., Morimatsu F., Zhang Y. Altitudinal variation of antioxidant components and capability in Indocalamus latifolius (Keng) McClure leaf // J. Nutr. Sci. Vitaminol. 2013. Vol. 59. Pp. 336-342. DOI: 10.3177/jnsv.59.336.

9. Габрук, Н. Г. Определение интегральной антиоксидантной активности различных экстрактов имбиря с помощью электрохимического детектирования / Н. Г. Габрук, Л. Ван Тхуан, И. И. Олейникова // Научные ведомости Белгородского государственного университета. Серия: Естественные науки. – 2012. – № 9(128). – С. 159-162.

10.

10. Хемилюминесцентная методика определения общей антиоксидантной емкости в лекарственном растительном сырье / Г. К. Владимиров, Е. В. Сергунова, Д. Ю. Измайлов, Ю. А. Владимиров // Вестник Российского государственного медицинского университета. – 2016. – № 2. – С. 65-72.

11.

11. Антиоксидантное действие эфирного масла тимьяна ползучего (Thymus serpyllum L.) / Л. Р. Варданян, С. А. Айрапетян, Р. Л. Варданян, А. Э. Аветисян // Химия растительного сырья. – 2013. – № 3. – С. 143-148.

12.

12. Биологически активные вещества и антиоксидантная активность растений рода Caragana из Горного Алтая / Е. П. Храмова, С. Я. Сыева, Т. А. Кукушкина, Т. М. Шалдаева // Химия растительного сырья. – 2023. – № 1. – С. 145-156. – DOI 10.14258/jcprm.20230111429.

13.

13. Фитохимический анализ и антиоксидантная активность экстрактов растений рода Vitex L. (Lamiaceae) / С. О. Володина, Е. В. Некрасова, Л. Ву Тхи [и др.] // Химия растительного сырья. – 2023. – № 3. – С. 171-181. – DOI 10.14258/jcprm.20230312150.

14.

14. Тринеева, О. В. Сравнительная характеристика определения антиоксидантной активности плодов облепихи крушиновидной различными методами / О. В. Тринеева // Разработка и регистрация лекарственных средств. – 2019. – Т. 8, № 4. – С. 48-52. – DOI 10.33380/2305-2066-2019-8-4-48-52.

15.

15. Тринеева, О. В. Определение антиокислительной активности лекарственного растительного сырья методом дифференциальной спектрофотометрии / О. В. Тринеева // Биофармацевтический журнал. – 2020. – Т. 12, № 6. – С. 43-49. – DOI 10.30906/2073-8099-2020-12-6-43-49.

16.

16. Белов, П. В. Фармакогностическое исследование каштана конского обыкновенного (Aesculus hippocastanum L.) как перспективного источника биологически активных веществ: специальность 14.04.02 «Фармацевтическая химия, фармакогнозия»: диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук / Белов Павел Викторович, 2020. – 164 с.

17.

17. Оценка активности антиоксидантной системы в листьях Aesculus hippocastanum в условиях урбанизации на примере города Ташкента / С. Н. к. Мухамедова, Ю. В. Левицкая, М. М. Абдуллаева [и др.] // Universum: химия и биология. – 2024. – № 4-1(118). – С. 31-35. – DOI 10.32743/UniChem.2024.118.4.17200.

18.

18. Mojžišová, G. Antiproliferative and antiangiogenic properties of horse chestnut extract / G. Mojžišová, J. Mojžiš, M. Pilátová, L. Varinská, L. Ivanová, L. Strojný, J. Richnavský // Phytotherapy Research. - February 2013. - Vol. 27, No. 2. - P. 159-165.

19.

19. Güney, G. The apoptotic effects of escin in the H-ras transformed 5RP7 cell line / G. Güney, H.M. Kutlu, A. Işcan // Phytotherapy Research. - June 2013. - Vol. 27, No. 6. - P. 900-905.

20.

20. Celep, A.G.S. Antioxidant capacity and cytotoxicity of Aesculus hippocastanum on breast cancer MCF-7 cells / A.G.S. Celep, S. Yilmaz, N. Coruh // Journal of Food and Drug Analysis. - September 2012. - Vol. 20, No. 3. - P.692 – 698,717.

21.

21. Патент № 2712069 C2 Российская Федерация, МПК G01N 33/15, G01N 33/52, G01N 21/75. Способ определения антиокислительной активности лекарственного растительного сырья и фитопрепаратов методом дифференциальной спектрофотометрии: № 2018120667: заявл. 04.06.2018: опубл. 24.01.2020 / О. В. Тринеева, М. А. Рудая, А. И. Сливкин; заявитель федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Воронежский государственный университет» (ФГБОУ ВО «ВГУ»).

22.

22. Государственная фармакопея Российской Федерации. 15-е изд. Москва, 2023 Т. 1 URL: http://pharmacopoeia.regmed.ru/ pharmacopoeia/izdanie-15/ (дата обращения: 12.02.2025).

23.

23. Методические рекомендации МР 2.3.1.1915-04 «Рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ» (утв. Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 2 июля 2004 г.