ROJECT "QUICK SOLUTION": RESEARCH OF EFFICIENCY OF DRUGS OF PLASMA OF THE DAPPLED DEER AT ASEPTIC DAMAGES OF THE CORNEA

Abstract


In article the problem of the correct empirical diagnostics and specific treatment of aseptic damages of a cornea rises. The diseases having similar symptom complex demand purpose of various active ingredients. The diseases that have similar symptomocomplex, require the appointment of various active substances. Research aimed at studying of increasing issues the efficiency of emergency care and methods patients with cornea pathology treatment with the help of applications of drugs based on blood of deer, as well as comparing the drug effectiveness based on deer blood and medicines used in standard treatment regimens. The study was conducted at the ophthalmology and pharmacology departments of VSMU. N. N. Burdenko, "DEER FARM". The group of experimental animals consisted of 30 laboratory rats, which, depending on the treatment were divided into 3 groups. Under the influence of anesthesia, mechanical damage to the corneal epithelium of a laboratory rat was inflicted by a disposable scarifier. Further, the damage diagnosis and the dynamics assessment the process was carried out.

Full Text

Актуальность. По данным исследований, в Российской Федерации насчитывается более 500 тыс. слепых и слабовидящих, из них до 18% приходится на пациентов с патологией роговицы [6]. Наиболее распространенными являются травматические кератиты роговицы, которые выявляются 44-89% и чаще возникают у лиц молодого возраста [3,9]. Недооцененное состояние пациентов на фоне перенесенной травмы, отсутствие своевременно оказанной офтальмологической помощи значительно повышает риск осложнений и реабилитационный период пациентов. Поражения роговицы остаются актуальной проблемой клинической офтальмологии. Залогом успешного лечения является правильный выбор лекарственного средства. Препараты, используемые для лечения кератитов, относятся к различным фармакологическим группам: антибиотики, синтетические антибактериальные средства, противовирусные, противогрибковые и противопаразитарные средства; антисептики, а так же препараты, улучшающие процессы эпителизации роговицы. При этом нужно отметить, что в последние годы значительно снизилась чувствительность современных антибиотиков и антисептиков к патогенной микрофлоре, что ставит перед нами задачу в поиске новых лекарственных средств широкого спектра действия с иммуномодулирующими свойствами. Основные мероприятия, рекомендуемые при механических эпителиальных повреждениях роговицы, сводятся к следующему: выявить и устранить причину корнеальных повреждений и провести необходимое медикаментозное лечение [1]. Существует необходимость применения новых высокоэффективных препаратов из высококачественного природного сырья для лечения пациентов с патологией роговицы. В настоящее время в офтальмологии для лечения пациентов с асептическими повреждениями роговицы (кератит при ювенильном ревматоидном артрите, синдром сухого глаза) применяется аутоплазма, обогащенная тромбоцитам. Она обладает рядом полезных свойств: ускоряет процессы регенерации тканей, противовоспалительный эффект, снижение болевого синдрома [2,7,8,11,12,13,14]. В настоящее время одним из перспективных препаратов для лечения асептических кератитов является плазма пятнистого оленя. Наиболее активным веществом плазмы оленя является гаптоглобин. На базе Института биохимической инженерии Национального университета Чао Тунг (Тайвань) было доказано, что он является чрезвычайно мощным антиоксидантом, который непосредственно защищает липопротеин низкой плотности (ЛПНП) от окисления, участвует в захвате высвобожденного гемоглобина во время чрезмерного гемолиза и в удалении свободных радикалов во время окислительного стресса, что способствует скорейшей регенерации повреждений [10]. Материал и методы исследования. Экспериментальное исследование проводилось на базе кафедр офтальмологии и фармакологии ФГБОУ ВО ВГМУ им. Н.Н. Бурденко, ООО «ДИР ФАРМ». Группу экспериментальных животных составили 30 лабораторных крыс (60 глаз) Wistar массой 200-220 г. Под действием анестезии (комбинированный препарат для общей анестезии животных содержащий тилeтaминa гидpoxлopид и зoлaзeпaмa гидрохлорид ЗолетилTM в дозе 0,3 мг в/м, миорелаксант Ксиланит в дозе 0,8 мг в/м, местный анестетик Алкаин (Проксиметакаин) 0,5% за веки по 2 капли двукратно) одноразовым скарификатором наносились механические линейные повреждения эпителия роговицы лабораторной крысы размером 3-4 мм. Для диагностики повреждений и оценки динамики процесса регенерации выполнялась окраска роговицы витальными красителями (тест-полоски лиссаминовый зеленый, флюоресцеин) с фотофиксацией - сразу после повреждения и на 1, 3, 7 и 12 сутки (в группе контроля). 30 лабораторных крыс с травматической эрозией роговицы в зависимости от применяемого лечения были разделены на 3 группы: 1 группа (10 крыс-20 глаз) - инстилляции в конъюнктивальную полость плазмы пятнистого оленя (ПО) по 1 капле 4 раза в сутки; 2 группа (10 крыс-20 глаз) - инстилляции в конъюнктивальную полость плазмы пятнистого оленя обогащенной тромбоцитами (ПООТ) по 1 капле 4 раза в сутки; контрольная группа (10 крыс-20 глаз) - стандартная схема лечения (СЛ) (за веки: Мирамистин 0,01% по 1 капля 4 раза в сутки, Корнерегель гель глазной (Декспантенол 5%) 1 капля 4 раза в сутки). ПО и ПООТ получали путем центрифугирования крови пятнистого оленя в лаборатории ООО «ДИР ФАРМ», замораживали при температуре -25С, в специальном термоконтейнере доставляли в лабораторию ВГМУ им. Н.Н. Бурденко. Полученные результаты и их обсуждение. Клиническое состояние глаз лабораторных крыс в первые сутки сразу после нанесения механической травмы и до начала лечения в трех группах характеризовалось признаками роговичного синдрома: светобоязнью, слезотечением, блефароспазмом. У экспериментальных животных объективно отмечали: гиперемия конъюнктивы глазного яблока; поверхностный дефект роговицы, форму и величину которого определяли с помощью витальных красителей. Механическая эрозия, нанесенная под местной анестезией Алкаином скарификатором, как в опытных, так и в контрольной группе имела линейную форму размером 3-4 мм, отмечался незначительный отек стромы роговицы в области линейного дефекта (рис.1) Рис. 1. Состояние роговицы и конъюнктивы лабораторной крысы после нанесения механического повреждения и окраски витальными красителями (флюоресциин+лиссаминовый зеленый). Сразу после нанесения скарификатов роговицы проводилось лечение всех трех групп в течение 7 дней: 1 группа (10 крыс-20 глаз) - инстилляции в конъюнктивальную полость плазмы пятнистого оленя (ПО) по 1 капле 4 раза в сутки; 2 группа (10 крыс-20 глаз) - инстилляции в конъюнктивальную полость плазмы пятнистого оленя обогащенной тромбоцитами (ПООТ) по 1 капле 4 раза в сутки; контрольная группа (10 крыс-20 глаз) - стандартная схема лечения (за веки: Мирамистин 0,01% по 1 капля 4 раза в сутки, Корнерегель гель глазной (Декспантенол 5%) 1 капля 4 раза в сутки) (рис. 2). Рис. 2. Лечение экспериментальных животных - инстилляции в конъюнктивальную полость (слева направо): ПО, ПОТО, мирамистин 0,01% и корнерегель. При осмотре глаз лабораторных животных 1 группы на 3 сутки: отсутствие роговичного синдрома, гиперемия конъюнктивы глазного яблока; поверхностный дефект роговицы округлой форму размером 1 мм, отмечался слабый отек стромы роговицы в области дефекта (рис. 3). Рис. 3. Состояние роговицы и конъюнктивы лабораторных крыс групп 2а, 2б; 3 день эксперимента; окраска витальными красителями. При осмотре глаз лабораторных животных 2 группы на 3 сутки: отсутствие роговичного синдрома; гиперемия конъюнктивы глазного яблока отсутствовала; эпителизация дефекта роговицы, что подтверждалось при окраске витальными красителями - отсутствием прокрашивания роговицы. При этом отмечали восстановление прозрачности, сферичности, гладкости, блеска и чувствительности роговицы на всех глазах (рис. 3). В контрольной группе у крыс сохранялся роговичный синдром: светобоязнь, слезотечение, блефароспазм; гиперемия конъюнктивы глазного яблока; окрашивание дефекта роговицы витальными красителями средней интенсивности, дефект округлой формы 2 мм с нечеткими границами на фоне диффузного отека роговицы (рис. 4). Рис. 4. Состояние роговицы и конъюнктивы лабораторных крыс контроольной группы; 3 день эксперимента; окраска витальными красителями. Динамическое наблюдение с проведением осмотра на 7 день показало, что эпителизация протекала следующим образом: в 1 и 2 группе у всех экспериментальных животных на 7-е сутки отмечали отсутствие роговичного синдрома и гиперемии конъюнктивы, отсутствие дефекта эпителия роговицы и прокрашивания роговицы витальными красителями. В контрольной группе на 7-е сутки у 6 лабораторных животных отмечали конъюнктивальную инъекцию глазного яблока, рубцовое помутнение роговицы округлой формы диаметром 2 мм в стадии эпителизации и незначительный отек стромы роговицы, окрашивание дефекта роговицы витальными красителями II умеренной интенсивности; у 2 лабораторных животных контрольной группы отмечали конъюнктивальную инъекцию глазного яблока, уменьшение диаметра раневого дефекта до 1 мм с нечеткими границами на фоне диффузного отека роговицы, окрашивание дефекта роговицы витальными красителями III средней интенсивности (рис. 5). Рис. 5. Состояние роговицы и конъюнктивы лабораторных крыс контроольной группы; 7 день эксперимента; окраска витальными красителями (флюоресциин+лиссаминовый зеленый) Рис. 6. Состояние роговицы и конъюнктивы лабораторных крыс контроольной группы; 12 день эксперимента; окраска витальными красителями (флюоресциин+лиссаминовый зеленый). В ходе динамического наблюдения было выявлено положительное влияние препаратов плазмы пятнистого оленя, которые применялись для лечения 1 и 2 группы, по сравнению с препаратами стандартного лечения, применяемых в контрольной групп, и отмечена неэффективность стандартного лечения лечения. Полное закрытие скарификата в 1 группе отмечали на 7 сутки, а во 2 группе уже на третьи сутки. Учитывая гуманное отношение к животным и положительный результат лечения 1 и 2 групп экспериментальных животных, было принято решение продолжить эксперимент в 3 контрольной группе и использовать в лечении плазму пятнистого оленя, обогащенную тромбоцитами в виде инстилляций в конъюнктивальную полость по 1 капле 4 раза в сутки. На 12 сутки у всех экспериментальных животных контрольной группы отмечалось отсутствие роговичного синдрома и гиперемиии конъюнктивы, закрытие дефекта эпителия роговицы и прокрашивания роговицы витальными красителями (рис. 6). Выводы. В результате экспериментального исследования было выявлено положительное влияние плазмы пятнистого оленя на репаративно-регенративные процессы в роговице: процесс заживления дефекта роговицы экспериментальных животных проходил быстрее и без осложнений при местном применении плазмы ПО и плазмы ПООТ, по сравнению со стандартным лечения, применяемых в контрольной группе. Плазма ПООТ показала наибольшую эффективность в лечении травматических повреждений роговицы. Применение плазмы ПО в эксперименте ускоряет закрытие дефекта и способствует более быстрому восстановлению роговицы после травматической эрозии, что требует дальнейших исследований в этом направлении.

About the authors

M. A Kovalevskaya

Voronezh State Medical University


O. V Donkareva

Voronezh State Medical University


T. A Berezhnova

Voronezh State Medical University


M. I Sergeeva

Voronezh State Medical University


N. S Preobrazhenskaya

Voronezh State Medical University


References

  1. Кадышев В.В. Репаративная терапия при экзогенном повреждении роговой оболочки / В.В. Кадышев, З. Халлуф // Клиническая офтальмология. - 2016. - №. 4. - С. 200-203.
  2. Ковалевская М. А. Синдром «сухого глаза» у пациентов, получавших лечение по поводу рака молочной железы и методы его коррекции / М.А.Ковалевская, Е.К.Туровец //Офтальмологические ведомости. - 2014. - Т. 7, №. 1.
  3. Ковалевская М. А. Способ выбора патогенетически обусловленной тактики лечения вирусных заболеванияй глазной поверхности / М.А.Ковалевская, Е.К.Туровец //Офтальмологические ведомости. - 2012. - Т. 5, №. 3.
  4. Ковалевская М.А. Защита глазной поверхности до и после операции ЛАСИК / М.А. Ковалевская, М.И.Сергеева, И.В.Черникова // Медицинский альманах. - 2012. - №. 4.
  5. Копаева В. Г. Глазные болезни/ В.Г. Копаева. - Москва: Медицина; - 2012. - С. 560.
  6. Лошкарева А. О. Применение богатой тромбоцитами плазмы у пациентов с хроническими эрозиями роговицы / А.О.Лошкарева, Д.Ю.Майчук //Современные технологии в офтальмологии. - 2016. - №. 4. - С. 131-132.
  7. Применение аутоплазмы, обогащенной тромбоцитами, в клинической практике / Е.Е. Ачкасов [и др.] //Биомедицина.-2013. -№. 4.
  8. Репаративная регенерация многослойного эпителия роговицы: биотехнологический потенциал / В.Г. Гололобов [и др.] // Гены и клетки. - 2008. - Т. 3, № 4. - С. 55-59.
  9. Синдром красного глаза : прак. рук-во для врачей-офтальмологов / М.А.Ковалевская [и др.] - Москва, 2010. - 108 c.
  10. A unique tetrameric structure of deer plasma haptoglobin - an evolutionary advantage in the Hp 202 phenotype with homogeneous structure. / I. H. Lai [et al.] //The FEBS Journal, - 2008. - Vol.275. - P.981-993.
  11. Autologous Platelet-rich Plasma Eye Drops in the Treatment of Recurrent Corneal Erosions / J.H. Lee [et al.] // Korean J. Ophthalmol. - 2016. - № 30(2). - Р. 101-107: doi: 10.3341/kjo.2016.30.2.101. (Дата обращеня: 25.03.2016)
  12. Autologous serum eye drops for dry eye / Q. Pan [et al.] // Cochrane Database Syst Rev. - 2017. - №2. - P. CD009327.
  13. Blood derived eye drops for the treatment of cornea and ocular surface diseases / G. Giannaccare [et al.] // Transfus Apher Sci. - 2017. - №56(4). - P. 595-604: doi: 10.1016/j.transci.2017.07.023. (Дата обращеня: 8.08.2017)
  14. The effect of immunologically safe plasma rich in growth factor eye drops in patients with Sjögren syndrome / R.M. Sanchez-Avila [et al.] // Ocul Pharmacol Ther. - 2017. - №33. - P. 391-399.

Statistics

Views

Abstract - 2

PDF (Russian) - 0

Article Metrics

Metrics Loading ...

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies