USE OF METHOD OF EMPIRICAL SELECTION OF PHARMACOTHERAPY IN CASE OF VAGINAL BIOCENOSIS DISORDERS WITH THE HELP OF PH-MEASUREMENT OF EXCRETIONS

Abstract


Несмотря на значительное количество методов для диагностики степени нарушения влагалищной микробиоты и подбора оптимальной фармакотерапии, применение этих методов достаточно ограниченно. Ограниченность использования обусловлена проблематичностью использования в массовом масштабе методов диагностики, не включенных в стандарты ОМС, а также тем фактом, что для многих групп пациенток достаточно применения скрининговых методик. Базовой скрининговой методикой является pH-метрия. Эффективность данного метода определяется использованием индикатора, реагирующего на изменение рН в необходимомдиапазоне. Статья посвящена возможности использования индикатора метилового красного для оптимизации подбора фармакотерапии у женщин с нарушением биоценоза влагалища. Предложены методика приготовления раствора индикатора для использования в качестве экспресс-диагностикума.

Full Text

Актуальность. В настоящее время разработано множество возможностей для диагностики степени нарушения влагалищной микробиоты и подбора оптимальной фармакотерапии [2, 6]. Однако имеется целый ряд ограничений для применения этих методик. Во-первых, в условиях современного российского здравоохранения проблематично использовать в массовом масштабе методы диагностики, не включенные в стандарты ОМС, а значит, не оплачиваемые страховой медициной. Во-вторых, существует целый ряд клинических ситуаций, когда такое углубленное обследование, направленное на идентификацию возбудителя, не требуется. К числу последних относится обследование женщин в позднем репродуктивном, перименопаузальном и менопаузальном периодах, а также женщин более молодого возраста, не планирующих беременность и роды. Этим пациенткам для назначения эмпирической фармакотерапии достаточно применения скрининговых методик [5,7, 9]. В последнее время для проведения экспресс-диагностики перед назначением эмпирической фармакотерапии все большую популярность приобретают методы, основанные на определении рН влагалищных выделений [2, 6]. Нормальный рН влагалища - величина постоянная, колеблется в пределах 3.8 - 4.6и определяется особенностями влагалищной микрофлоры. Нормальная микробиота представлена в основном лактобациллами (концентрация их - не менее 107), вырабатывающими молочную кислоту, которая и создает кислую среду. Если количество лактобацилл повышается, то кислотность выделений также усиливается, формируется так называемый цитолитический тип среды. В большинстве случаев при развитии патологической микрофлоры кислотность влагалища уменьшается, вплоть до развития нейтральной или даже щелочной среды. Так проявляют себя грибы рода Candida, трихомонады, гарднереллы, неспецифические аэробы и анаэробы. Для каждого из этих возбудителей характерен свой уровень повышения рН влагалища. Таким образом, точно измерив кислотность влагалищных выделений, можно ориентировочно определить характер изменений влагалищной микробиоты и назначить соответствующую фармакотерапию. Кроме того, хочется подчеркнуть, что даже у пациенток, активно использующих современные диагностические возможности для постановки диагноза, pH-метрия часто используется как промежуточный этап контроля качества лечения. На фоне лечения по мере восстановления микрофлоры кислотность влагалища постепенно нормализуется. Определение рН на уровне 4,0-4,4 в течение 4-х недель после окончания лечения - маркер восстановления влагалищного биоценоза [1,3] pH-метрия является общедоступным, простым в использовании методом, для ее проведения не требуется специального оборудования, ее можно проводить в кабинете акушера-гинеколога с выделениями, взятыми на поверхность влагалищного зеркала или на предметном стекле. Также хочется подчеркнуть низкую себестоимость этого метода. Основным фактором, определяющим эффективность рН-метрии, является качественный индикатор. Он должен быть высокочувствительным, реагировать на незначительные изменения рН среды. Кроме того, в случае непосредственного контакта с телом пациентки индикатор должен быть нетоксичным и гипоаллергенным [4]. Поэтому совершенствование методик экспресс-диагностики заболеваний нижнего отдела репродуктивного тракта женщины в настоящее время направлено, в основном, на поиск индикатора, удовлетворяющего вышеназванным условиям. Материал и методы исследования. В работе были использованы следующие реактивы: метиловый красный (ч.д.а.); этиловый спирт - 95% (х.ч.); глицерин (ч.д.а.), буферные растворы: стандарт-титры для приготовления буферных растворов - рабочих эталонов рН 3-го разряда СТ-рН-04.3. (состав фиксаналов приведён в [8]). В соответствии с ГОСТ 4919.1-77 «Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов» был приготовлен индикатор сравнения (эталон) по следующей методике: 0,01 г метилового красногорастворяли в 10 мл этилового спирта. В связи с тем, что предварительные эксперименты продемонстрировали, что метиловый красный не растворим в глицерине, методика приготовления экспериментального раствора была изменена следующим образом:0,05 г метилового красного растворяли в 2 мл этилового спирта, затем доводили глицерином до общего объема 10 мл; Далее было взято 0,5 мл (10 капель) индикатора (эталон), в которые постепенно добавлялись растворы с рН=4,01, 5,0 и 6,86 до изменения окраски индикатора. Аналогичные эксперименты были проведены с экспериментальным раствором индикатора. Полученные результаты и их обсуждение. В работе исследовали возможность приготовления раствора метилового красного в глицерине и изменение окраски индикатора в этом растворе при различных рН. Метиловый красный (метилрот, диметил аминазо бензолкарбоновая кислота) - основной кислотно-щелочной индикатор сточкой перехода рН4,2 -6,3; в кислой среде - красный, в щелочной-желтый [10]. Проба с метиловым красным широко применяется в бактериологии для дифференциации некоторых видов энтеробактерий. При приготовлении раствора индикатора в соответствии с ГОСТ 4919.1-77 (эталон) наблюдалось хорошее растворение индикатора, полученный раствор имел оранжевый цвет. При приготовлении раствора индикатора в этиловом спирте (2 мл) и последующем доведении раствора глицерином до 10 мл цвет раствора был малиново-красным. В первом эксперименте к 10 каплям индикатора (эталон) постепенно добавлялись растворы с рН=4,01, 5; и 6,86 до изменения окраски индикатора. Уже при добавлении 2 капель раствора с pH=4.01 окраска раствора менялась на ярко-красную, последующее увеличение объема добавляемого раствора приводило к появлению малиновой окраски. При добавлении 5 капель раствора с рН=5 окраска раствора становилась оранжевой и не менялась при дальнейшем увеличении объёма добавляемого раствора. При добавлении уже 5 капель буферного раствора с pH=6,86 цвет индикатора резко изменялся с оранжевого на желтый, а при дальнейшем добавлении буферного раствора с pH=6,86 цвет становился светло-желтым. В дальнейших экспериментах к 5 каплям экспериментального раствора индикатора добавляли растворы с различным рН до изменения окраски индикатора. Также проводилось сравнение окраски экспериментального раствора индикатора, с эталоном сравнения. Для экспериментального раствора индикатора добавление 10 капель раствора с pH=4.01 изменяло окраску на ярко-малиновую, дальнейшее добавление раствора с pH=4.01 приводило к появлению светло-малиновой окраски, вызванной разбавлением раствора. При добавлении 5 капель раствора с рН=5 окраска раствора становилась насыщенно оранжевой, при дальнейшем увеличении объёма добавляемого раствора оранжевый цвет становился менее интенсивным. Изменение цвета при добавлении буферного раствора с рН=6,86появлялось уже после добавления двух капель раствора - цвет становился оранжево-желтым. При дальнейшем добавлении раствора с рН=6,86 цвет раствора оставался оранжево-желтым и лишь становился светлее вследствие разбавления. Полученные растворы имели идентичную окраску при добавлении 30 капель раствора с рН=6,86 к эталонному индикатору и раствору индикатора в глицерине. Выводы. Для эмпирического подбора фармакотерапии и промежуточного контроля качества лечения нарушений биоценоза влагалища может быть использован метод рН-метрии влагалищных выделений с чувствительным индикатором. Метиловый красный является в целом походящим индикатором для динамического контроля за изменением рН влагалищных выделений. Метиловый красный, растворенный в спирте с последующим доведением раствора глицерином, достаточно чувствителен к изменению рН. Достаточная чувствительность раствора метилового красного в требуемом интервале рН позволяет рекомендовать индикатор для дальнейших исследований.

About the authors

N. V. Khoroshikh

Voronezh State Medical University


Yu. Yu. Madykin

Voronezh State Medical University


V. O. Mittova

Voronezh State Medical University


A. A. Soloveva

Voronezh State University


References

  1. O’Hanlon D. E., Vaginal pH measured in vivo: lactobacilli determine pH and lactic acid concentration/ D.E. O’Hanlon , R.A. Come,T.R. Moench //BMC Microbiology. - 2019. - Vol. 19. - P. 13-24.
  2. Акушерство и гинекология. Дифференциальная диагностика от А до Я: пер. с англ./ под ред. Н.М.Подзолковой.- Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 400 с.
  3. Гинекология. Национальное руководство. Краткое издание / под ред. Г.М. Савельева, Г. Т. Сухих, И. Б. Манухина. - Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2017.- 704 с.
  4. Единые санитарно-эпидемиологические и гигиенические требования к товарам, подлежащим санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю). Решение Комиссии Таможенного союзаю -28.05.2010 № 299. -URL: https://www.alta.ru/tamdoc/10sr0299 (дата обращения 24.02.2019)
  5. Совершенствованные подходы в лечении осложненного бактериального вагиноза и вульвовагинального кандидоза / А.Н. Стрижаков [и др.]//Акушерство и гинекология. - 2018.-N 12.-С.142-148. 6. RanjitE., Prevalence of bacterial vaginosis and its association with risk factors among nonpregnant women: a hospital based stud / E. Ranjit [et al.] //International Journal of Microbiology. - 2018. - ID 8349601 (дата обращения 20.02.2019).
  6. Рациональная фармакотерапия в акушерстве, гинекологии и неонатологии: руководство для практикующих врачей. /од общ. ред. В. Н. Серова, Г. Т. Сухих. - 2-е изд., Москва : Литтерра, 2014. - 736 с.
  7. Шефер К. Лекарственная терапия в период беременности и лактации /под ред. К. Шефер, Х. Шпильманн, К. Феттер. - Москва : Логосфера, 2010. -768 с.
  8. Sabnis R.W. HandbookofAcid-BaseIndicators /R.W. Sabnis. - NewYork: CRCPress,2007. -416 p.

Statistics

Views

Abstract - 0

PDF (Russian) - 0

Article Metrics

Metrics Loading ...

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies