Development of a technique for the quantitative determination of telmisartan preparations by UV spectrophotometry

Full Text

Актуальность. Распространенным сердечно-сосудистым заболеванием в России на сегодня является артериальная гипертензия, затрагивающая 40% взрослого населения [3]. В связи с этим на фармацевтическом рынке широко представлен диапазон антигипертензивных лекарственных средств. К ряду блокаторов ангиотензинных рецепторов относятся сартаны, отличающиеся хорошей переносимостью и положительным влиянием на почки. Среди таких – телмисартан, который и является объектом данного исследования. Помимо снижения артериального давления он снижает гипертрофию кардиомиоцитов, в терапии может сочетаться с тиазидными диуретиками [2]. Качество является важнейшим показателем эффективности лекарственного средства. Для его контроля проводятся анализы в соответствии с фармакопейной статьей. Так, для количественного определения телмисартана предложен титриметрический метод в неводной среде, который является высокотоксичным. Среди других, упоминающихся в различных литературных источниках методов, встречаются высокоэффективная жидкостная хроматография [7], которая требует дорогостоящих стандартных образцов и оборудования; флуоресцентный анализ [1], применяемый для биологического материала; спектрофотометрический метод [5, 6] с труднодоступными органическими растворителями. Поэтому актуальной задачей на сегодня является оптимизация новых методов количественного определения лекарственного вещества с корреляцией выше перечисленных недостатков.

Цель исследования. Изучить оптические характеристики вещества, возможность применения УФ-спектрофотометрии (УФ-СФМ) для контроля качества лекарственных средств, содержащих телмисартан, и разработать методику количественной оценки данным методом в варианте замещения государственных стандартных образцов (ГСО) внешними оптическими образцами сравнения (ООС).

Материал и методы исследования.  Для проведения исследования использовали таблетки с содержанием действующего вещества 40 мг и 80 мг «Телмиста» («KPKA», Словения), субстанции метилового красного квалификации «х.ч.» и калия гексацианоферрат (III) квалификации «ч.д.а.»; натрия гидроксида раствор 0,1 М; кислоты хлористоводородной раствор 0,1 М; спирт этиловый 95%, воду очищенную.

Испытуемый и растворы оптических образцов сравнения готовили по следующим методикам.

Точная навеска  0,28 г порошка растёртых таблеток растворяли в 100 мл натрия гидроксида растворе 0,1 М. Полученный раствор фильтровали, 1 мл фильтрата доводили до 50 мл растворителем соответствующим оптическому образцу сравнения кислоты хлористоводородной раствором 0,1 М или спиртом этиловым 95%.

Точная навеска  0,05 г  метилового красного растворяли в 100 мл спирта этилового 95 %. Аликвоту 1 мл доводили до 25 мл кислоты хлористоводородной раствором 0,1 М.

Точная навеска  0,15 г  калия гексацианоферрата (III) растворяли в 100 мл воды очищенной. Аликвоту 5 мл доводили до 50 мл спиртом этиловым 95%.

Оптическую плотность растворов измеряли на приборе СФ-2000, одновременно для испытуемого и раствора ООС при длинах волн 292 нм для метилового красного и 298 нм калия гексацианоферрата (III).

Расчёты количественного содержания действующего вещества, проводились по формуле:

Х=;

где: А_x – оптическая плотность испытуемого раствора; A_ст – оптическая плотность стандартного образца; Q_x – точная навеска порошка растертых таблеток; Q_ст – точная навеска оптического образца сравнения; K_пер – коэффициент пересчёта, соответствующего оптического образца сравнения; V_1х, V_2х – объем мерных колб первого и второго разведения испытуемого образца; V_1оос, V_2оос – объем мерных колб первого и второго разведения оптического образца сравнения; V_а/х – объем аликвоты испытуемого образца; V_а/оос – объем аликвоты оптического образца сравнения; M_cp – средняя масса одной таблетки.

Полученные результаты и их обсуждение. Метод спектрофотометрии предложен для количественного определения телмисартана ввиду его возможности поглощать УФ-излучение за счёт наличия сопряженных связей в структуре. Подтверждением этому служит приведенный на рисунке 1, УФ-спектр поглощения препарата. Изменение спектральных свойств препарата в зависимости от растворителя, обеспечивающих охват диапазона рН от 2 до 13 незначительно. Снижение кислотности среды приводит к батохромному сдвигу, в нейтральной и слабощелочной среде наблюдается гипохромный эффект. Максимальные значения оптической плотности отмечались при следующих длинах волн: рН 1,4 (HCl): 292,1 ± 2 нм; рН 10,4 (H₂O): 296,6 ± 2 нм; рН 11,9 (C₂H₅OH ): 298,2 ± 2 нм; рН 12,6 (NaOH): 295,1 ± 2 нм.

Рис. 1. Спектры поглощения растворов телмисартана, в следующих растворителях: 1 – NaOH, 2 – HCl, 3 – H2O, 4 – C2H5OH

Затем проводилось исследование стабильности вещества во времени в данных растворителях, оптическая плотность приготовленных растворов измерялась на протяжении 6 часов. По результатам исследования было определено, что наиболее стабильными растворителями, в которых лекарственное вещество почти не изменяет своих оптических свойств, оказались кислоты хлористоводородной раствор 0,1 М и спирт этиловый 95%.

Рис. 2. Стабильность телмисартана в различных растворителях.

Концентрация раствора, обеспечивающая наиболее точное определение оптической плотности, подбиралась экспериментально по градуировочному графику и составила 0,000008 г/мл.

Значительные затруднения в использовании физико-химических методов вызывает необходимость государственных стандартных образцов, в виду высокой стоимости, далеко не всегда доступных небольшим лабораториям. Основываясь на данных литературы [4], метод УФ-СФМ допускает вариант замены ГСО на внешние ООС, проявляющие схожие спектральные характеристики в диапазоне изучаемой области. Основным критерием выбора соединения на роль ООС, кроме близости длин волн, проявления максимумов поглощения УФ-излучения, являлась их устойчивость в выбранном растворителе. Наиболее подходящими кандидатами являются метиловый красный и калия гексацианоферрат (III). Представленная область их применения, составляющая 280-300 нм в кислоте хлористоводородной растворе 0,1 М для метилового красного и 290-316 нм в растворе спирта этилового 95 %, оптимальна для растворов телмисартана проявляющего максимальные значения оптической плотности при 292 ± 2 нм и 298 ± 2 нм в соответствующих условиях. Приведенные данные подтверждаются УФ-спектрами поглощения представленные на рис. 3 и 4.

Рис. 3. УФ - спектры поглощения
1 – метилового красного (0,00002 г/мл) в кислоты хлористоводородной растворе 0,1 М
2 – телмисартана (0,000008 г/мл)

Рис. 4. УФ - спектры поглощения
1 – калия гексацианоферрата (III) (0,00015 г/мл) в спирте этиловом 95%
2 – телмисартана (0,000008 г/мл)

Уменьшение влияния различий спектральных параметров и обеспечение корреляции результатов осуществляли с помощью расчета коэффициента пересчета для используемого ООС. Для предложенных соединений значения индивидуальны и представлены в таблице 1.

Таблица 1 – Определение коэффициента пересчёта

ООС	Метиловый красный	Калия гексацианоферрат (III)
Метрологические характеристики (n=20, р=95%)
̅Х	0,5009	0,0788
S2	6E-06	3E-06
S	0,0075	0,0016
Sx	0,0017	0,0004
SR	0,015	0,021
Δx	0,0035	0,0008
Σ,%	0,7	0,97

 

Апробация сформированной методики проводилась для количественного определения содержания действующего вещества, в таблетках двух дозировок: 40 и 80 мг. Полученные результаты были подвергнуты статистической обработке, по результатам которой относительная ошибка не превышала 2% для обоих ООС
(табл. 2).

Таблица 2 – Количественная оценка телмисартана в лекарственной форме с использованием внешних оптических образцов сравнения

ООС	Метиловый красный	Калия гексацианоферрат (III)	Метиловый красный	Калия гексацианоферрат (III)
Метрологические характеристики (n=20, р=95%)
	Дозировка 0,040 г (должно быть 0,036-0,044 г)		Дозировка 0,080 г (должно быть 0,072-0,088 г)
̅Х	0,0401	0,0403	0,0809	0,079
S2	0,063*10-5	0,071*10-5	0,064*10-5	0,047*10-5
S	0,804*10-3	0,847*10-3	0,253*10-2	0,217*10-2
Sx	0,18*10-3	0,19*10-3	0,56*10-3	0,48*10-3
SR	0,02	0,021	0,031	0,027
Δx	0,376*10-3	0,396*10-3	0,118*10-2	0,102*10-2
Σ,%	0,94	0,98	1,45	1,28

 

Как видно из приведенных данных, результаты, полученные для каждого из ООС сопоставимы, что позволяет применять предложенные ООС как экономически выгодную альтернативу использованию ГСО для количественного определения телмисартана.

Выводы. На основе собранной информации была сформирована методика оценки количественной оценки телмисартана в лекарственной форме с содержанием 40 и 80 мг методом УФ-спектрофотометрии с использованием в качестве образцов сравнения метилового красного и калия гексацианоферрата (III).

About the authors

Svetlana Sergeevna Konovalova

Irkutsk State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation

Author for correspondence.
Email: svetlanakonovalova987@yandex.ru

first-year resident, assistant at the Department of Pharmaceutical and Toxicological Chemistry

Russian Federation, 664003, Russia, Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya Street, 1

Вероника Sergeevna Moshkovich

Irkutsk State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation

Email: svetlanakonovalova987@yandex.ru

student

Russian Federation, 664003, Russia, Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya Street, 1

Xenia Alekseevna Karpova

Irkutsk State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation

Email: karpova2599@mail.ru

graduate student

Russian Federation, 664003, Russia, Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya Street, 1

Elena Anatolievna Illarionova

Irkutsk State Medical University of the Ministry of Health of the Russian Federation

Email: illelena24@mail.ru

Doctor of Chemistry, Professor, Head of the Department of Pharmaceutical and Toxicological Chemistry

Russian Federation, 664003, Russia, Irkutsk, Krasnogo Vosstaniya Street, 1

References