SPOSOB VYYaVLENIYa POVREZhDENIYa SARKOLEMMY KARDIOMIOTsITOV IZOLIROVANNOGO SERDTsA POSLE IShEMII RAZLIChNOY DLITEL'NOSTI

Abstract

Full Text

Актуальность. Для оценки повреждения сарколеммы кардиомиоцитов используют обычно показатель выхода миоглобина в оттекающий перфузионный раствор. Однако, одного этого показателя бывает недостаточно, особенно, когда степень повреждения кардиомиоцитов в различных сериях экспериментов близка друг к другу. Учитывая это, целью предложения явилась разработка такого показателя, которой бы давал информацию при минимальном наборе исходных данных. Основой для данного предложения явились данные о низкой чувствительности интактных клеток к снижению осмотического давления по сравнению с ишемически поврежденными кардиомиоцитами. Материал и методы исследования. Эксперименты проводились на изолированных сердцах белых беспородных крыс, перфузированных через аорту оксигенированным раствором Рингера- Локка следующего состава (в мМ): NaC1-140; NаН20РО4- 0,5; КС1- 3;трис-ОН- 5 (рН=7,4); глюкозы-11; СаС12 -2. Под эфирным наркозом крыс декапитировали, вскрывали грудную клетку и сердце помещали в охлажденный раствор. Для предотвращения тромбозов крысам предварительно внутрибрюшинно вводили гепарин (200 Ед/кг). Через канюлю, введенную в аорту, подавали исходный раствор со скоростью 10 мл/мин на 1 грамм влажной массы (t= 37 оС) в течение 15 минут для стабилизации сократительной функции и метаболизма миокарда. Затем коронарный кровоток прекращали, моделируя тем самым ишемию миокарда. После 30 минут или 45 минут ишемии коронарный кровоток восстанавливали в прежнем объёме. В отдельных сериях экспериментов реперфузию осуществляли гипотоническим раствором ([Na+] = 80 mM, [Ca2+]= 0,5 мМ). Состояние проницаемости сарколеммы оценивали по интенсивности выхода из сердца миоглобина, как наиболее раннего маркера повреждения сарколеммы, по сравнению с другими белками, высвобождающихся из клеток при их повреждении. Для этого в оттекающем перфузионном растворе оценивали содержание миоглобина спектрофотометрически при длине волны 410 нм. Сократительную активность миокарда изучали в изоволюмическом режиме с помощью латексного баллончика, введенного в полость левого желудочка. В работе был использован электроманометр фирмы "Bentley lab. Europe" и аналого-цифровой преобразователь для IBM PC. Полученные данные обработаны с помощью программы “AWPE” (автор - А.И.Глотов) и математически методом вариационной статистики с использованием критерия t Стьюдента, анализа вариации ANOVA. В работе использованы креатин фирмы “Chemapol” (Чехия), трис-ОН и соли фирмы “Sigma” (США), диацетил- фирмы “Меrсk” (Германия). Остальные реактивы отечественного производства квалификации "х.ч.". Полученные результаты и их обсуждение. Исследования показали, что в период постишемической реперфузии происходит повышение как коронарного давления (рис.1а, графики 1а,1б) так и диастолического давления (рис. 1а, графики 11а, 11б). При этом достоверные отличия в показаниях после 30 минут ишемии и 45 минут ишемии не выявлены (p<0,5). Концентрация миоглобина в оттекающем перфузионном растворе (рис. 1б) после 30 минут ишемии достоверно не отличалась от концентрации миоглобина после 45 минут ишемии (p<0,5). Таким образом, исходные данные не показали каких - либо существенных отличий в изучаемых показателях несмотря на различное восстановление сократительной функции сердца после 30 минут и 45 минут ишемии. После ишемии длительностью 30 минут восстановление развиваемого давления составило 0%- 25% от исходного (обратимая, но выраженная ишемия), после ишемии длительностью 45 минут сокращения левого желудочка не восстанавливались (необратимая ишемия) (рис. 1а). Достоверных отличий между группами экспериментов в восстановлении развиваемого давления не наблюдалось (p=0,5). Реперфузия гипоосмотическим раствором («гипоосмотический шок») не приводила к заметным изменениям аортального и диастолического давления по сравнению с группами экспериментов, в которых реперфузию проводили исходными растворами с физиологическим осмотическим давлением (ри.2а для ишемии длительностью 30 минут, рис. 2б для ишемии длительностью 45 минут). Однако, количество миоглобина в оттекающем реперфузионным растворе в этих 2-х сериях экспериментов существенно отличались. Так, реперфузия гипоосмотическим раствором после 30 минут ишемии приводила к выходу всего 9,90 + 0,25 мкмоль миоглобина, а реперфузия таким же раствором после 45 минут ишемии сопровождалась выходом 49,6 + 2,5 мкмоль миоглобина. Таким образом, при необратимой ишемии реперфузия гипоосмотическим раствором приводит к интенсивному выходу миоглобина из сердца по сравнению с экспериментами с частично обратимой ишемией. Это важное свойство может быть использовано и для выявления дефектов сарколеммы в время гипоперфузионной ишемии.
×

About the authors

V V Alabovskiy

A A Vinokurov

References

  1. Белевитин А.Б., Тыренко В.В. Бессимптомная ишемия миокарда. Лекция / А.Б. Белевитин, В.В. Тыренко ; Воен.-мед. акад. СПб., 2003.
  2. Никитин А.Э., Свистов А.С., Филиппов А.Е., Тыренко В.В., Каляев А.В., Никифоров В.С. Влияние ишемии миокарда на аритмическую активность у больных ишемической болезнью сердца. Диагностика и лечение нарушений регуляции сердечно-сосудистой системы 2002. С. 191-197.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies