MORPHOLOGY OF BRONCHOALVEOLAR LAVAGES IN BRONCHIAL ASTHMA PATHOGENESIS

Abstract

Biopsy materials of bronchoalveolar lavages were examined with the use of electron-miscroscopic analysis of bronchial asthma dynamics. The essence of structural changes in bronchoalveolar lavage cells was identified, characteristic for the processes occurring in bronchial wall at acute condition of bronchial asthma; this enables to find the optimal treatment scheme taking into account pathogenesis, stage, extension and pathology reversibility.

Full Text

Актуальность. За последние годы достигнут значительный прогресс в понимании морфологической сущности процессов, лежащих в основе большинства заболеваний органов дыхания. Современная клиническая морфология располагает многими методами диагностики болезней органов дыхания. Среди них наибольшее значение имеют цитологическое исследование бронхоальвеолярных смывов (бронхоальвеолярный лаваж), биопсия бронхов и легких. Эти достижения связаны с возможностью получения и изучения биопсийного материала практически всех отделов дыхательной системы при помощи современных морфологических методов исследования, таких как иммунногистохимия, электронная микроскопия, ауторадиография, люминесцентная микроскопия. Полученные новые данные о ранних структурных проявлениях болезней органов дыхания позволяют использовать результаты морфологической диагностики для эффективного лечения (1). В то же время недостаточно расшифрованы ультраструктурные изменения в бронхоальвеолярных смывах в динамике развития патологии при бронхиальной астме. В связи с этим целью настоящей работы явилось определение макро- и микроскопических проявлений бронхиальной астмы, объяснение их причин и механизмов развития, оценка исхода и вероятных осложнений (7). Материал и методы исследования. Для получения бронхоальвеолярного смыва и его подготовки для анализа была использована специальная методика. Методика подготовки БАС для исследования. Бронхоальвеолярный смыв получали под местной или общей анестезией при проведении фибробронхоскопии. При выполнении бронхоальвеолярного лаважа вводли сначала 50 мл стерильного забуференного физиологического раствора с последующей его аспирацией, что составляло бронхиальную порцию лаважа (или бронхиальный смыв). Затем вводили еще 150-200 мл, дробно по 50 мл, последовательно аспирируя жидкость, которая и составляла собственно бронхоальвеолярный смыв. Лаважная жидкость собиралась в химически чистую пластиковую посуду, чтобы исключить прилипание клеток к стенкам посуды (2,3). После центрифугирования и нескольких этапов фиксации материал насыщали смолой эпон 812 в течение суток и полимеризовали при 37оС и 60оС - 48 часов с последующим контрастированием 4% уранилацетатом и цитратом свинца и исследовали в электронном микроскопе Тесла ВS-500 при ускоряющем напряжении - 90 квт. При выбранном режиме центрифугирования и взятых экспозициях успешно проводились этапы постфиксации, отмывания и обезвоживания, несмотря на то, что одна сторона препарата находилась в непосредственном контакте со стенкой пробирки (5). Согласно рекомендациям Рабочей группы по бронхоальвеолярному лаважу Европейского респираторного общества (4, 7) нормальным считали следующий состав бронхиальной порции жидкости бронхоальвеолярного лаважа: Полученные результаты и их обсуждение. У всех обследованных нами больных бронхиальной астмой бронхоальвеолярный смыв состоял из клеточного детрита, агрегатов эпителиальных клеток бронхов, пластов слущенного эпителия, комплексов эозинофилов и гранулярных мембран лизофосфолипаз в сочетании с большим числом дегранулированных эозинофилов и наличием единичных тучных клеток. Наблюдалось увеличение числа клеток бронхиального эпителия с признаками дистрофии при одновременном снижении числа альвеолярных макрофагов, что свидетельствовало о наличии выраженного воспалительного процесса. Клетки эпителиального пласта находились в состоянии некробиоза. Реснички эпителия сохранялись, однако, цитоплазма клеток в одних случаях содержала гомогенную гиалоплазму средней электронной плотности, в других - вакуолизированные и дистрофически изменённые органоиды типа митохондрий. Здесь же, в цитоплазме, встречались миелиновые включения, а эндоплазматическая сеть полностью разрушалась. Ядра становились пикнотичными с обилием гетерохроматина по периферии нуклеоплазмы. Клеточные и осмиофильные конгломераты обнаруживались вне клеточных структур и состояли из фрагментов цитоплазмы и её органоидов. Из последних преимущественно встречались одиночные митохондрии. Осмиофильные включения в основном имели электронноплотный матрикс, но выглядели нерезкими и огрубевшими. Среди клеток встречалось обилие дегранулированных эозинофильных клеток (до 15-18%), которые сохраняли целостность структурной организации. Ядра их располагались эксцентрично, выглядели слегка пикнотично и сохраняли свою целостность, а в цитоплазме диффузно располагались шаровидные гранулы чёрного цвета на фоне светлой вакуолизированной субстанции. Нередко встречались единичные тучные клетки в состоянии дистрофии, главным образом, цитоплазматических органоидов. У некоторых больных встречались клетки эпителия в состоянии глубокой дистрофии и некробиоза, что свидетельствовало о длительно существующем диффузном хроническом воспалении в стенке бронхов. При этом обнаруживались изменения не только в их цитоплазме в виде уплотнения или вакуолизации, фрагментации органоидов, но и в ядрах в виде пикноза или гомогенизации однородной бесструктурной массы нуклеоплазмы. Выводы. Таким образом, на субклеточном уровне установлены процессы структурной дезорганизации при бронхиальной астме, позволяющие оценить патогенетические механизмы развития, распространённость процесса и степень его обратимости, что, в целом, необходимо при выборе правильной тактики лечения больных БА.