EXPERIMENTAL STUDY OF NEW MEANS OF LOCAL HEMOSTASIS IN THE TREATMENT OF GASTRIC BLEEDING

Abstract


We Studied haemostatic, adhesive, reparative properties and biological inertness of new hemostatic agents (polygamists, jelplast, NovoSeven) and hydrophilic granular sorbents (gelvin, unlovin, diovin, diolefin, Sephadex). The in vitro experiments was performed using native blood donor volunteers on electrocochleography N-334. The invivo experiments performed on 15 mongrel dogs. The results showed that the maximal hemostatic activity have jelplast and NovoSeven, and leading in its hemostatic activity among granular sorbents is diovin, and sephadex. The experiment has proved that the combined use of zaplatani and divine is the best combination, amplifying haemostatic effect with simultaneous acceleration of processes of regeneration in gastric ulcers.

Актуальность. Непреходящей проблемой ургентной хирургии является остановка язвенных гастродуоденальных кровотечений [3,5,8,11,15]. В вопросах лечения больных с гастродуоденальными кровотечениями особое место занимает проблема экстренного эндоскопического гемостаза [4,8,10,11,12,14,16]. Решающим в исходе заболевания являются два фактора: то, как скоро удается достигнуть максимально стойкого гемостаза и насколько быстро и заживает язвенный дефект как источник осложнений [2,6,7,9]. Заживление гастродуоденальных язв принципиально отличается от регенерации повреждений других тканей: оно происходит в условиях действия на поверхность дефекта агрессивных факторов среды. Это требует, прежде всего, защиты от них поверхности дефекта. Чем быстрее это произойдёт, тем меньшим будет повреждение тканей и тем выше качество заживления [1,2,6,9,13]. В последние время распространение получили гидрофильные гранулированные сорбенты для остановки гастродуоденальных кровотечений [2,3,4,10,11]. Однако авторы отмечают случаи рецидивов геморрагий у больных с состоявшимся кровотечением и необходимость проведения повторных попыток эндоскопического гемостаза или экстренной операции. В этой связи поиск новых методов, разработка современных средств гемостаза, обладающих высокой эффективностью и простотой применения, является неотложной проблемой хирургии. Цель исследования: изучить в сравнительных условиях гемостатическую и репаративную активность, а также биологическую инертность новых кровоостанавливающих материалов и их комбинацию с гидрофильными гранулированными сорбентами. Материал и методы исследования. Экспериментальные исследования in vitro выполнены с кровью здоровых добровольцев. В качестве новых местных гемостатических средств были использованы желпластан, новосэвен, полигемостат, в качестве гранулированных сорбентов были исследованы гелевин, аниловин, диовин, диотевин, сефадекс марки G-25. Гемостатическая активность препаратов оценивалась методом дифференцированной электрокоагулографии с использованием электрокоагулографа Н-334[3,7]. В экспериментах in vitro с кровью каждого донора проводили несколько опытов. В первом опыте кювета с донорской кровью была без исследуемого материала и использовалась как контрольная. Во втором опыте производилась оценка свойств гемостатической активности путем добавления в ячейку прибора фиксированного объема каждого из изучаемых препаратов. Оценку коагулограмм производили по следующим параметрам: t0 - время прошедшее от момента взятия крови до начала записи; t1 - время начала свертывания; t2 - время конца свертывания; t3 - начало ретракции и фибринолиза; t - продолжительность процесса свертывания; Vc1 - скорость свертывания за первую минуту; Vc2 - скорость свертывания за вторую минуту; Vc3 - скорость свертывания за третью минуту; Aм- амплитуда максимальная; A0 - амплитуда минимальная (отражает плотность сгустка). Экспериментальное исследование in vivo произведены на 15 беспородных собаках. Все исследования проводились со строгим соблюдением принципов, изложенных в Европейской концепции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других целей (г. Страсбург, Франция, 1986) Приказом МЗ РФ от 12.08.1977 г. (Правила проведения работ по защите позвоночных животных) и согласно правилам лабораторной практики Российской Федерации (приказ МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г.). Каждой собаке воспроизводили по две язвы желудка, таким образом исследования были произведены на 30 экспериментальных язвах желудка. Модель язвы желудка создавали на основе методики, описанной Е.Ф. Чередниковым [12]. Животным под наркозом во время проведения фиброгастроскопии пункционной иглой вводили 3,0 мл этилового 96% спирта в подслизистый слой стенки желудка в области антрального отдела по малой кривизне как наиболее частой локализации язв желудка. Затем внутривенно производили инъекцию раствора винкристина из расчета 0,01 мг/кг массы животного. На 3-4 сутки у всех животных отмечалось развитие типичной язвы желудка: дефект 1,0 см в диаметре округлой формы с выраженным воспалительным валом вокруг и фибринозно-некротическим налетом на дне. Язвенной кровотечение воспроизводили путем механической травматизации биопсийными щипцами дна и краев язвенного дефекта. Все животные были разделены на две группы: опытную (8 животных) и контрольную (7 животных). Местное лечение экспериментальных кровоточащих язв желудка в опытной группе начинали с проведения лечебной эндоскопии путем нанесения на язвенный дефект желпластана с последующей инсуффляцией диовина. В контрольной группе у животных отмечали динамику самопроизвольной остановки кровотечения и сроки заживления язвенных дефектов. Эндоскопические наблюдения за изменениями в опытных и контрольных дефектах производили через день. Результаты экспериментального исследования оценивали последующим показателям: общее состояние животного, динамическое эндоскопическое наблюдение за размерами дефектов, время остановки кровотечения, рецидивы кровотечения, сроками заживления моделированных язв с учетом данных гистологического и гистохимического исследований, цветовой микроскопии. Материалом для морфологических исследований служили биоптаты, полученные во время каждой эндоскопии из краев и дна язв (через день). Полученный материал фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина по общепринятой гистологической методике, после чего приготовлялись срезы. Препараты окрашивались гематоксилином и эозином, для выявления коллагена - пикрофуксином по методу Ван-Гизона. Нейтральные гликопротеиды и гликоген определяли с помощью PAS-реакции. Для выявления кислых гликопротеидов использовали окраску альциановым синим по Ситидмену. Гистологические препараты просматривали в световом микроскопе. Полученные результаты и их обсуждение. Изучение в эксперименте in vitro гемостатической активности местных гемостатических средств и гидрофильных гранулированных сорбентов показало, что все исследуемые препараты обладают выраженной достоверной гемостатической активностью относительно контрольного исследования. Максимальная гемостатическая активность наблюдалась из гемостатических средств у желпластана и новосэвена, а из гранулированных сорбентов - у диовина и сефадекса. Дальнейшие исследование были продолжены in vivo на лабораторных животных - собаках с целью изучения целесообразности использования желпластана в комбинировании с диовином для эндоскопического лечения кровотечений из дефектов желудка, моделированных в эксперименте. Для этого на 15 беспородных собаках воспроизведены кровоточащие дефекты желудка. Эндоскопическая картина, наблюдаемая в процессе воспроизведения и заживления кровоточащих язв, была идентичной для всех животных. У всех собак на 3-4 сутки после введения в подслизистый слой стенки желудка этилового спирта и последующей внутривенной инъекцией винкристина отмечалось развитие типичного язвенного дефекта 1,0 см в диаметре. Язвенное кровотечение воспроизводили путём механической травматизации биопсийными щипцами дна и краёв язвенного дефекта. При изучении показателей в опытной и контрольной группах животных были выявлены существенные различия. Время спонтанной остановки кровотечения при воспроизведении кровотечения в контроле составило в среднем 27,45 секунды. При нанесении на область кровоточащего дефекта желпластана и диовина кровотечение останавливалось в среднем на 3,92 секунде. При этом следует отметить, что сразу после нанесения желпластана наблюдался выраженный гемостатический эффект, а последующая инсуффляция диовина приводила к набуханию сорбента, закрытию гидрогелевым слоем язвенной поверхности, защищая при этом весь язвенный дефект от агрессивных факторов желудочного содержимого. При анализе сроков и качества заживления дефектов желудка были выявлены существенные различия. На 3-4 сутки от начала исследования в контрольных группах язвенные дефекты оставались прежних размеров, края язв были отёчны, гиперемированы, дно закрыто фибрином. В опытных язвах в эти же сроки язвенные дефекты уменьшались в размерах, воспалительные явления стихали, в дне язв появлялись островки грануляций, начинала отмечаться краевая эпителизация. Средний срок заживления контрольных язв составил 15,67 суток. При этом язвенный дефект во всех случаях заживал в виде рубца, деформирующего стенку органа. Средний срок заживления опытных язв составил 8,62 суток. При этом язвенный дефект заживал в виде нежного рубца, не деформируюшего стенку органа. Важно также отметить, что диовин, образуя защитный гидрогелевый слой на язвенной поверхности, создавал оптимальные условия для репаративной регенерации (аналогия заживления под струпом). Проведение контрольных эндоскопических исследований показало, что повторных кровотечений или других каких-либо осложнений, связанных с применением желпластана и диовина в лечении кровоточащих язв желудка, не наблюдалось. Выводы. Исследованные гемостатические средства (полигемостат, желпластан, новосевен) и гидрофильные гранулированные сорбенты (гелевин, аниловин, диовин, диотевин, сефадекс марки G-25) обладают высокой гемостатической активностью. При этом максимальная гемостатическая активность наблюдается у желпластана и новосевана, а из гранулированных сорбентов - у диовина и сефадекса. Экспериментальные исследования комбинированного применения желпластана и диовина для местного лечения моделированных кровоточащих язв желудка у собак позволили заключить, что они обладают как кровоостанавливающей способностью, так и противовоспалительным и стимулирующим процессы регенерации действием, не оказывая при этом никаких вредных побочных воздействий на живые ткани и организм животного. Применение желпластана в сочетании с диовином позволяет надёжно остановить кровотечение из моделируемых язв желудка, сокращая время гемостаза в 7 раз и ускоряя сроки заживления в 1,8 раза.

E F Cherednikov

Voronezh State Medical University

M A Kashurnikova

Voronezh State Medical University

M N Romantcov

Voronezh State Medical University

S V Barannikov

Voronezh State Medical University

A E Bolchovitinov

BUZ in Voronezh "VGKBSMP №1»

D G Gaponenkov

BUZ in Voronezh "VGKBSMP №1»

P U Lubimov

BUZ in Voronezh "VGKBSMP №1»

  1. Диагностика язвенных форм рака желудка / В.Е. Баев, Б.Б. Кравец, Е.Ф. Чередников [и др.]. - Воронеж, 2003. - 112с.
  2. Исследование комбинированного применения диотевина и диовина при местном лечении моделированных пептических язв / А.В. Попов, Е.Ф. Чередников, О.Г. Деряева, И.Ф. Овчинников, Арт.В. Попов// Вестник новых медицинских технологий. - 2013. - Т. 13, №2. - С. 426-430.
  3. Комплексное лечение эрозивно-язвенных гастродуоденальных кровотечений у больных многопрофильного стационара / О.Г. Деряева, Е.Ф Чередников// Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2014 - Т.13, №3 - С 725-730.
  4. Лечение больных с неязвенными гастродуоденальными кровотечениями с использованием новых технологий / А.Р. Баткаев, Ю.В. Малеев, Е.Ф. Чередников [и др.] // Вестник хирургической гастроэнтерологии. - 2009. -№ 2. - С. 27-32.
  5. Лечение больных с пищеводно-желудочными кровотечениями в условиях работы специализированного центра / Е.Ф. Чередников [и др.] // Вестник экспериментальной и клинической хирургии. - 2012. - Т.5, № 4. - С. 699-704.
  6. Морфологические особенности моделирования язв желудка при лечении гидрогелями / Е.Ф. Чередников, Н.А. Степанян, Е.Н. Любых // Новости клинической цитологии России. - 1988. - №2. - С.66.
  7. Новый подход к механизму образования разрывов при синдроме Меллори-Вейсса / Е.Ф. Чередников, Ю.В. Малеев, А.Р. Баткаев, А.В. Черных, И.В. Аристов, А.В. Данилян // Вестник Воронежского государственного университета. Серия: Химия. Биология. Фармация. - 2005. - №1. - С. 156-165.
  8. Опыт инновационного подхода к решению проблемы острых желудочно-кишечных кровотечений / Е.Ф. Чередников [и др.] // - Вестник экспериментальной и клинической хирургии. - 2010. - Т.3, №4. - С. 436-437.
  9. Репаративная регенерация эрозивно-язвенных поражений желудка и ДПК при местном лечении гидрофильными гранулированными сорбентами / Е.Ф. Чередников, А.Р. Баткаев, В.Е. Баев // Системный анализ и управление в биомедицинских системах. - 2005. - Т.4, №2. - С. 224-225.
  10. Современные направления профилактики и лечения больных с желудочно-кишечными в условиях центра / Е.Ф. Чередников, О.Г. Деряева, В.В. Адианов, И.Ф. Овчинников, Арт. В. Попов// Системный анализ и управление в биомедецинских системах. - 2014 - Т.13, №2. - С. 426-430.
  11. Чередников Е.Ф. Диагностика и лечение больных с гастродуоденальными кровотечениями в специализированном центре / Е.Ф. Чередников [и др.]: методические рекомендации. - Воронеж, 2014. - 35 с.
  12. Чередников Е.Ф. Комплексное лечение гастродуоденальных язв с применением гелиевых сорбентов (клинико-эксперим. исследование): дис. д-ра мед. наук / Е.Ф. Чередников; Воронеж. ГМА им. Н.Н. Бурденко. - Воронеж, 1998. -210 с.
  13. Чередников Е.Ф. Комплексное лечение неязвенных гастродуоденальных кровотечений с использованием внутрипросветных эндоскопических технологий /Е.Ф. Чередников, А.Р. Баткаев // Вестник экспериментальной и клинической хирургии.-Москва,2009.-Т.2,№4.-С.291.
  14. Forrest Y.A., Finlayson N.D., Shearman D.Y. Endoscopy in gastrointestinal bleeding//Lancet.-1974.-Vol.2.-H.394-397.
  15. Yansen D.M. Treatment of patients at high risk for recurrent bleeding from a peptic ulcer/D.M. Yansen// Ann. Ynt.Med.-2003.-Vol.139, № 4. - 394-397.
  16. CherednikovЕ.F., Kunin A.A., Cherednikov E.E., Moiseeva N.S.[The role of etiopathogenetic aspects in prediction and prevention of discontinuous-hemorrhagic (Mallory-Weiss) syndrome]. The EPMA Journal. 2016; (7:7).

Views

Abstract - 1

PDF (Russian) - 0

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies