MORPHOMETRIC STUDY ADRENAL CORTEX IN EARLY BURN SHOCK

Full Text

Актуальность. В настоящее время возрастает интерес к изучению механизмов повреждения и структурной перестройке органов эндокринной системы, вызванной различными патологическими факторами [1, 2, 3, 4]. Учитывая актуальность ожоговых травм с частым развитием шоковых состояний, при которых происходит активация ряда органов и систем, нам представилось интересным выявить основные закономерности морфологической перестройки коркового вещества надпочечников при экспериментальном термическом ожоговом шоке. Материал и методы исследования. Исследование носило экспериментальный характер и осуществлялось на беспородных собаках в соответствии с «Правилами гуманного обращения с лабораторными животными» и методическими указаниями МЗ РФ «Деонтология медико-биологического эксперимента» (1987) и проводилось в соответствии с приказами Минвуза СССР № 742 от 13.11.84 «Об утверждении правил проведения работ с использованием экспериментальных животных» и № 48 от 23.01.85 «О контроле за проведением работ с использованием экспериментальным животных». Экспериментально животным на боковые поверхности грудной клетки наносили глубокий (IIIБ - IV степени) термический ожог 10 % поверхности тела в течение 50 - 55 сек до прогрева подкожно-жировой клетчатки в пределах 58 - 60Со. Контроль прогревания тканей осуществляли методом тканевой термометрии с помощью милливольтметра и игольчатых термопар, вводимых под кожу. Глубину ожога подтверждали при последующем гистологическом исследовании обожженной кожи. Площадь ожога рассчитывали с учетом площади поверхности тела. Площадь поверхности тела животного находили по формуле: S = 0,116 , где S - площадь поверхности тела, м2; М - масса тела, кг [5]. О тяжести наносимой ожоговой травмы в эксперименте судили по основным клинически значимым параметрам центральной гемодинамики: артериальное давление (АД), центральное венозное давление (ЦВД), периферическое венозное давление (ПВД), частота сердечных сокращений (ЧСС), частота дыхательных движений (ЧДД), лабораторным показателем являлся гематокрит (Ht). Наблюдаемые изменения позволяют говорить о I степени ожогового шока (табл.1).[6]. Таблица 1. Изменения параметров гемодинамики при ожоге. Показатели (Mmp) Этапы исследования Исход Ожог 1 час 2 часа 3 часа 5 часов АД, мм.рт.ст. 104,041,27 144,252,62 148,502,54 137,752,24 114,001,87 81,752,03 р - <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 ЦВД, ммвод.ст. 52,561,33 57,952,73 62,752,64 54,502,22 45,202,10 27,101,38 р - >0,05 <0,01 >0,05 <0,01 <0,001 ПВД, ммвод.ст. 95,561,36 100,703,71 104,852,17 94,403,21 93,052,75 91,402,65 р - >0,05 <0,01 >0,05 >0,05 >0,05 ЧСС, сокр./мин. 132,160,86 156,701,74 148,951,43 145,151,08 139,450,98 133,101,20 р - <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 >0,05 ЧДД, дд./мин. 22,650,24 30,150,47 25,650,48 23,300,38 21,450,29 21,050,26 р - <0,001 <0,001 >0,05 <0,01 <0,001 Ht, % 40,900,36 41,800,50 45,500,60 50,600,68 55,050,52 60,050,39 р - <0,05 <0,001 <0,001 <0,001 <0,001 Морфометрическое исследование было проведено в соответствии с принципами системного количественного анализа [7]. Морфометрические измерения проводились с помощью программы ImageTool для Windows Vista. Была использована 2 версия программного обеспечения для анализа изображения на РС платформе, работающего под управлением операционных систем Microsoft Windows Vista. Фотоаппарат при помощи высокоскоростного интерфейса был соединен с компьютером. Преобразование в цифровую форму визуализируемых объектов осуществлялось автоматически аппаратными средствами. Анализ цифровых данных производился при помощи установленного на компьютере программного обеспечения UTHSCSA ImageTool for Windows в режиме реального времени. Также срезы подвергались стереометрическому анализу с помощью окуляр - микрометра. Основными критериями количественной морфометрии служили наиболее значимые и достаточно информативные показатели, позволяющие составить достаточно полное представление об изменении морфометрических показателей изучаемого органа. Для наиболее объективной оценки морфофункционального состояния коры надпочечников использовалась следующая методика: в каждом препарате проводились две перпендикулярные к поверхности надпочечника линии, начиная с внутренней поверхности капсулы с одной стороны и заканчивая таковой с противоположной стороны. При этом определяли ширину коркового вещества, ширину отдельных зон, вычислялось их процентное соотношение. В каждой зоне определялась средняя высота эндокриноцитов и средний диаметр ядер профильных полей. К 6 часам наблюдаемого послеожогового периода толщина коркового вещества и процентное соотношение толщины зон не претерпевали существенных изменений. Так толщина коры составляла 1490,91  4,38 мкм, соотношение клубочковой / пучковой / сетчатой зон составляло 15,4%/72,7%/11,8% соответственно (рис. 1,2). Рис. 1. Соотношение зон коркового вещества, исход Рис. 2. Соотношение зон коркового вещества ожог 6 часов Влияние ожога к 6 часам отразилось на количественных показателях. Так, толщина клубочковой зоны составляла 229,26 ± 0,96 мкм, увеличиваясь на 11,69% по сравнению с контрольной серией (табл. 2).Высота эндокриноцитов клубочковой зоны была 14,22  0,17 мкм, увеличиваясь на 7,38%, диаметр ядра при этом составлял 9,13  0,21 мкм, увеличиваясь на 11,94% (табл. 3). Толщина пучковой зоны в среднем была равна 1084,54 ± 3,05 мкм, увеличение происходило на 0,78% от нормы (табл. 2). Эндокриноциты пучковой зоны имели среднюю высоту 18,75  0,31 мкм, что являлось выше контрольных показателей на 3,84%. Средний диаметр ядра эндокриноцитов пучковой зоны достоверно составлял 9,33  0,37 мкм, увеличиваясь на 2,89% (табл. 3). Сетчатая зона имела толщину 177,11 ± 1,56 мкм, увеличиваясь на 0,38% (табл. 2).Высота эндокриноцитов сетчатой зоны была равной 10,22  0,23 мкм, увеличиваясь на 0,39% по сравнению с контрольной серией. Диаметр ядра эндокриноцитов сетчатой зоны составлял 7,81  0,12 мкм (табл. 3). Таблица 2. Толщина и процентное соотношение зон коры надпочечников при ожоге Серия Исследуемые показатели Общая толщина коры (мкм) Клубочковая зона (мкм; % толщины) Пучковая зона (мкм; % толщины) Сетчатая зона (мкм; % толщины) Контроль 1454,935,07 202,46±1,12; (13,4 %) 1076,03±2,11; (74,4 %) 176,44±1,21; (12,2 %) Ожог; 6 часов 1490,914,38 229,26±0,96; (15,4%) 1084,54±3,05; p (72,7%) 177,11±1,56; (11,8%) p < 0,001 <0,001; <0,001; <0,001; Ожог; 24 часа 1667,895,97 269,43±1,34; (16,1%) 1219,15±3,33; p (73,1%) 179,31±1,42; (10,7%) p < 0,001 < 0,001 < 0,001 < 0,001 Через 24 часа после нанесения ожоговой травмы толщина коры увеличивалась на 12,77%, и составляла 1667,89  5,97 (табл. 9), при этом процентное соотношение толщины слоев клубочковой / пучковой / сетчатой зон составляло 16,1% / 73,1% / 10,7% соответственно (рис. 3). Рис. 3. Соотношение зон коркового вещества ожог 24 часа Клубочковая зона к 24 часам увеличилась на 24,86% по сравнению с контрольной серией и составляла 269,43 ± 1,34 мкм (табл. 2). Высота эндокриноцитов клубочковой зоны в среднем была равна 16,87  1,22 мкм, увеличиваясь на 21,93%. Средний диаметр ядра эндокриноцитов данной зоны был равен 10,19  0,12 мкм, увеличиваясь на 21,10% (табл. 3). Толщина пучковой зоны составляла 1219,15± 3,33 мкм, что являлось больше на 11,74% по отношению контрольной серией (табл. 2). Высота эндокриноцитов пучковой зоны увеличилась на 8,34% и составляла 19,67  1,09 мкм. Средний диаметр ядра эндокриноцитов пучковой зоны был равен 10,28  0,93 мкм, увеличиваясь на 11,87% (табл. 3). Сетчатая зона имела ширину 179,31 ± 1,42 мкм, увеличиваясь на 1,60%, и составляла 10,7% от общей толщины коры (табл. 2). При этом высота эндокриноцитов сетчатой зоны была равна 10,35  0,47 мкм, средний диаметр ядер 7,83  0,33 мкм, увеличиваясь на 1,64% и 0,64% соответственно (табл.3). Таблица 3. Средние показатели высоты эндокриноцитов и диаметра ядра при ожоге Серия Исследуемые показатели (мкм) Клубочковая зона Пучковая зона Сетчатая зона Высота клеток Диаметр ядра Высота клеток Диаметр ядра Высота клеток Диаметр ядра Контроль 13,17  0,12 8.04  0,07 18,03  0,17 9,06  0,09 10,18  0,14 7,78  0,07 Ожог 6 часов 14,22  0,17 p < 0,001 9,13  0,21 p < 0,001 18,75  0,31 p < 0,001 9,33  0,37 p < 0,001 10,22  0,23 p < 0,001 7,81  0,12 p < 0,001 Ожог 24 часа 16,87  1,22 p < 0,001 10,19  0,78 p < 0,001 19,67  1,09 p < 0,001 10,28  0,93 p < 0,001 10,35  0,47 p < 0,001 7,83  0,33 p < 0,001 Результаты проведенной морфометрии показали, что мере прогрессирования ожогового шока происходящее увеличение клеточных размеров и ширины зон отразилось и на изменении размеров всего коркового вещества с изменением процентного соотношения слоев. Через 24 часа после нанесения ожоговой травмы происходило достоверное увеличение толщины коры на 12,77%, составляя 1667,89  5,97 мкм, при этом процентное соотношение толщины слоев клубочковой / пучковой / сетчатой зон составляло 16,1% / 73,1% / 10,7% соответственно. В течение 24 часов после ожоговой травмы морфометрические показатели, указывают на высокую функциональную активность коры надпочечников. Толщина коры увеличивалась за счет клубочковой и пучковой зон, ведущее к изменению процентного соотношение толщины слоев. Происходит расширение зон коры, увеличение клеточных размеров и их ядер (рис.5,6). Также следует отметить, что наблюдаемое утолщение слоев в основном происходило за счет увеличения высоты клеток и нередко в процентных числах совпадало. К исходу суток ожога в большей степени выраженные изменения наблюдаются в пучковой зоне коры надпочечников. Наименее выраженные изменения - в сетчатой зоне. Рис. 4. Изменение диаметра ядра эндокриноцитов при ожоге Рис. 5. Изменение высоты эндокриноцитов при ожоге Выводы. Комплекс морфологических изменений в корковом веществе надпочечников при ожоговом шоке приобретает компенсаторный характер, влекущий к функциональной активности, основу которой составляет морфологическая перестройка ткани.

About the authors

SA A Mozerov

National Research Nuclear University

AN N Myalin

National Research Nuclear University

AA A Chekushkin

Penza State University

YV V Yunyashina

Penza State University

References