IMMUNOLOGIC INDEXES IN PATIENTS WITH RHEUMATOID ARTRITIS

Abstract

Immunologic indexes of the patients with rheumatoid arthritis was studied. The maximum changes was detected in humoral link of immunity. Between the immunologic indexis and some of the parametrs of coagulogram and the activity of rheumatoid process was found out correlation dependence.

Full Text

Актуальность. Основу патогенеза ревматоидного артрита (РА) составляет системное аутоиммунное воспаление с преимущественной локализацией в синовиальной оболочке суставов. Для этого заболевания характерна генетическая предрасположенность и наличие приобретенных дефектов нормальных механизмов иммунорегуляции [Тимофеев В.Т., 2000,]. Ранее нами была изучена роль дисфункции эндотелия, перекисного окисления липидов в патогенезе анемии у больных ревматоидным артритом [Гребенникова Л.Г., 2003, Гребенникова Л.Г., 2005]. Для оценки состояния иммунной системы у больных РА и связи этих показателей с уровнем гемоглобина, показателями активности заболевания и свертывающей системы крови проведено обследование 39 больных. Материалы и методы исследования. В основу клинического исследования больных РА были положены критерии Американской ревматологической ассоциации. Степень активности процесса устанавливали на основании комплекса клинико-лабораторных критериев, предложенных институтом ревматологии РАМН [Насонова В.А., Астапенко М.Г., 1989], рентгенологическую стадию определяли по критериям O. Steinbrocker (1949), диагностику некоторых висцеральных проявлений (склерит, неврит, тиреоидит) устанавливали на основании соответствующих дополнительных диагностических исследований с участием врачей-специалистов. Для характеристики иммунологического статуса использовались следующие методы: 1. Определение общего количества лимфоцитов в периферической крови по методу Jondall et all в модификации Чередеева А.Н. с соавт. 2. Оценку популяций Т-лимфоцитов (СД3+) и В-лимфоцитов (СД19+), субпопуляций Т-лимфоцитов: Т-хелперы/индукторы (СД4+) и Т-супрессоры/цитотоксические (СД8+) проводили с помощью монокло-нальных антител в цитотоксическом тесте с использованием отечест-венных коммерческих моноклональных антител фирмы «Сорбент». 3. Оценку фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови проводили путем восстановления нитросинего тетразолия. Оценка поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов для исследования фагоцитоза проводилась со стафилококком. Определяли фагоцитарный показатель - процент клеток, участвующих в реакциях фагоцитоза (у здоровых лиц он составляет 40-80), фагоцитарный индекс Гамбургера - среднее количество микробов, поглощенных активным нейтрофилом (в норме 4-9). 4. Определение уровня ЦИК по Digeon M. et all в модификации Логин-ского В.Е. с соавт. 5. Иммуноглобулины сыворотки классов M, G, A определяли по Mancini et all. Исследование свертывающей системы крови включало определение активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ), тромбинового времени, уровней фибриногена, растворимых фибрин-мономерных комплексов, антитромбина III (АТ III), индуцированных эуглобулинового фибринолиза и агрегации тромбоцитов с унифицированным индуктором активации и ристомицином. Использовались реактивы НПО “РЕНАМ” Ассоциации больных гемофилией ГНЦ РАМН. Забор крови для анализа производился натощак из локтевой вены в силиконированную пробирку с 3,8% раствором цитрата натрия в соотношении 9:1. Полученные результаты и их обсуждение. В зависимости от уровня гемоглобина (Нв) больные разделены на три группы: с уровнем Нв менее 100 г/л (среднее значение 94,18±2,16 г/л), в пределах 100-119 г/л (среднее значение 114,00±0,88 г/л) и свыше 120 г/л (среднее значение 127,09±1,46 г/л). Результаты исследования представлены в таблице. При анализе абсолютных значений параметров клеточного иммунитета отклонений от нормальных значений и различий этих показателей в зависимости от уровня Нв не обнаружено. При вычислении иммуно-регуляторного индекса, составляющего у здоровых 1-2, выявлено увеличение его у пациентов всех групп, свидетельствующее о дисбалансе основных регуляторных субпопуляций Т-лимфоцитов. Достоверных различий этого показателя между группами не выявлено. Анализ параметров гуморального звена иммунитета выявил различные нарушения спектра иммуноглобулинов сыворотки крови. Повышение уровня IgG обнаружено у всех больных РА: в первой группе этот показатель составил 16,49±0,97 г/л, во второй - 15,49±1,68 г/л, в третьей - 13,78±1,42 г/л, что было достоверно выше (р<0,05), чем у субъектов контрольной группы (11,50±2,40 г/л). При увеличении концентрации Нв уровень IgG имел тенденцию к снижению, но без статистически значимых различий. Увеличение концентрации IgM и IgA в сыворотке крови обнаружено у части больных с анемией. Повышение уровня ЦИК сыворотки крови выявлено у всех больных РА. Достоверных различий по этому показателю у пациентов с различным уровнем Нв не найдено. Таблица. Иммунологические показатели у больных ревматоидным артритом. Показатель групппы 1гр (n=17) 2гр (n=11) 3 гр. (n=11) Контр. гр (n=10) Нв 94,18± 2,16 р<0,05 114,0± 0,88 р<0,05 127,1± 1,46 р<0,05 153,3± 3,23 СОЭ 48,35± 3,87 р<0,05 24,33± 4,84 р<0,05 15,90± 2,78 р<0,05 8,01± 2,38 Серомукоиды 8,82± 0,10 р<0,05 0,47± 0,12 р<0,05 0,34± 0,06 р<0,05 0,18± 0,04 Гексозы 1764,70±64,62 р<0,05 1463,33 ±93,52 р<0,05 1308,00 ±76,24 р<0,05 1142,01 ±11,13 Церулоплазмин 0,36± 0,02 р<0,05 0,30± 0,03 р<0,05 0,23± 0,02 р<0,05 0,16± 0,06 β2-глобули ны 10,99 ±0,67 р>0,05 10,45 ±1,64 р>0,05 8,97 ±0,11 р>0,05 9,98 ±1,15 γ-глобулины 26,20 ±1,62 р<0,05 23,00 ±2,06 р<0,05 22,70 ±1,23 р<0,05 18,45 ±1,08 АЧТВ 35,33 ±1,39 р<0,05 36,13 ±2,52 р<0,05 37,00 ±1,45 р<0,05 38,92 ±0,63 Фибриноген 4,46± 0,48 р<0,05 3,61± 0,43 р<0,05 3,37± 0,09 р<0,05 2,58± 0,15 РФМК 8,85± 1,87 р<0,05 6,06± 0,95 р<0,05 4,73± 0,82 р>0,05 4,78± 0,18 Лейкоциты 5,99± 0,53 р>0,05 5,14± 0,46 р>0,05 6,60± 0,63 р>0,05 5,40± 1,20 Лимфоц., % 22,41± 1,87 р>0,05 26,44 ±1,60 р>0,05 21,64± 2,28 р>0,05 28,04± 9,01 Лимфоц., абс. 1,28± 0,11 р<0,05 1,51± 0,21 р>0,05 1,44± 0,23 р>0,05 2,04± 0,96 Т-лимф. (%) 63,65± 1,96 р>0,05 72,56 ±2,23 р<0,05 62,36 ±2,09 р>0,05 61,04 ±3,02 Т-лимф. (абс.) 0,75 ±0,05 р<0,05 1,00 ±0,12 р>0,05 0,74 ±0,01 р>0,05 1,01± 0,14 В-лимф. (%) 9,38 ±0,84 р>0,05 10,78 ±1,49 р>0,05 10,64 ±1,22 р>0,05 11,89 ±4,01 В-лимф. (абс.) 0,12± 0,02 р>0,05 0,14± 0,001 р>0,05 0,14 ±0,01 р>0,05 0,185 ±0,07 Т-хелп. (%) 46,13 ±2,39 р>0,05 50,67 ±4,41 р>0,05 45,55 ±3,35 р>0,05 46,03 ±6,46 Т-хелп. (абс.) 0,56± 0,05 р>0,05 0,69± 0,07 р>0,05 0,64± 0,10 р>0,05 0,81± 0,12 Т-супр. (%) 15,44 ±1,74 р>0,05 21,89 ±3,90 р<0,05 16,82 ±3,13 р>0,05 13,47 ±5,36 Т-супр. (абс.) 0,19± 0,03 р>0,05 0,27± 0,07 р>0,05 0,25± 0,06 р>0,05 0,232± 0,108 ЦИК 143,56 ±14,12 р<0,05 142,00 ±30,41 р<0,05 133,91 ±6,66 р<0,05 108,56 ±10,35 IgG 16,49 ±0,97 р<0,05 15,49 ±1,68 р<0,05 13,78 ±1,42 р<0,05 11,50 ±2,40 IgM 1,82 ±0,23 р>0,05 2,98 ±0,88 р>0,05 1,75 ±0,24 р>0,05 1,65 ±0,83 IgA 3,09 ±0,34 р>0,05 2,58 ±0,45 р>0,05 2,41 ±0,53 р>0,05 2,04 ±0,86 Для оценки гуморального звена использовались также индексные показатели - отношение иммуноглобулинов различных классов к содержанию В-лимфоцитов в 1 мкл крови. Обнаружено достоверное повышение отношений IgG/В-лимфоциты, IgM/В-лимфоциты, IgA/В-лимфоциты у пациентов с уровнем Нв менее 120 г/л по сравнению с больными без анемии. Это закономерно, учитывая, что в основе патогенеза заболевания лежат аутоиммунные нарушения. Исследование системы фагоцитоза выявило умеренные изменения показателей, характеризующих этот процесс (фагоцитарные число и индекс, спонтанный и активированный НСТ-тесты, индекс активации), чаще встречающиеся у больных с анемией. Несмотря на то, что среднее арифметическое некоторых параметров, отражающих состояние фагоцитарной функции нейтрофилов, было в пределах нормальных значений, при анализе индивидуальных данных снижение этих показателей выявлено у 30 % больных и встречается чаще у пациентов с анемией. С целью выявления взаимосвязи между изученными показателями и параметрами коагулограммы, красной крови проведен корреляционно-регрессионный анализ, в результате которого установлено наличие тесных связей между большинством показателей. Наиболее значимыми из параметров иммунограммы оказались: фагоцитарное число (r=0,9 для АЧТВ, r=-0,62 для гематокрита), НСТ спонтанный (r=0,8 для АЧТВ, r=0,63 для Нв) и активированный (r=-0,69 для серомукоидов, r=-0,65 для фибриногена), ЦИК (r=-0,64 для Нв), количество Т-лимфоцитов (r=1,0 для СОЭ) и В-лимфоцитов (r=-0,77 для серомукоидов, r=-0,75 для фибриногена), Т-хелперы (r=-1,0 для СОЭ, r=-0,67 для фибриногена, r=-0,61 для церулоплазмина), Т-супрессоры (r=-0,62 для фибриногена и альбумина). Выводы. Таким образом, у всех больных ревматоидным артритом выявлены изменения в иммунологическом статусе. Активация иммунной системы сопровождается параллельным нарастанием активности свертывающей системы крови, изменениями показателей активности заболевания и параметров красной крови.