CHANGES IN THE LEVEL OF ALKALINE PHOSPHATASE AND ALANINE AMINOTRANSFERASE IN THE BLOOD AFTER LONGTERM ADMINISTRATION OF NSAIDS AND NEW CYANOTHIOACETAMIDE DERIVATIVES


Cite item

Full Text

Abstract

Changes in the biochemical analysis of rat blood by the level of alkaline phosphatase and alanine aminotransferase after two weeks of administration of the most commonly used NSAIDs and new cyanothioacetamide derivatives with the most pronounced analgesic activity were studied. Of the studied five new original cyanothioacetamide derivatives with pronounced analgesic properties, administered daily intra-gastrally for 14 days at a dose of 5 mg / kg, the safest in terms of effects on liver function in terms of alkaline phosphatase and alanine aminotransferase is a compound with the laboratory cipher d02-123

Full Text

Актуальность. Нестероидные противовоспалительные препараты в настоящее время считаются одной из самых востребованных групп лекарственных средств, которые пользуются популярностью среди различных областей медицины благодаря своему уникальному сочетанию противовоспалительного, жаропонижающего и анальгетического действия [2]. По данным ВОЗ около 20% населения мира регулярно используют препараты этой группы для снятия болевого синдрома [9].

Несмотря на такой спектр положительных эффектов от применения данных препаратов, возникает и ряд неблагоприятных реакций [4, 6]. К подобного рода эффектам данной группы препаратов необходимо отнести гепатотоксичность, ульцерогенность, нефротоксичность, гематотоксичность, нейротоксичность, кардиотоксичность и др [3, 7]. Именно поэтому появилась необходимость в поиске высокоэффективных и безопасных лекарственных средств с выраженной болеутоляющей активностью.

Наше внимание привлекли новые гетероциклические соединения из ряда производных цианотиоцетамида, которые были исследованы нами в классических фармакологических тестах на наличие анальгетических свойств. При проведении нами исследований в тесте орофациальной тригеминальной боли, были получены результаты, что соединения d02-141 и d02-154 на 10-й минуте проявили анальгетическую активность в 1,8-1,9 выше, чем метамизол натрий, а препараты d02-123 и d02-149 в 3,5 раза на 10-й и 15-й минутах наблюдения[1].

Наиболее актуальным является изучение влияния НПВС и синтезированных новых гетероциклических соединений с анальгетической активностью на состояние печени в хроническом эксперименте [5]. Таким образом, мы оценивали их возможное гепатотоксичное действие.

Материал и методы исследования. Эксперимент был проведен на 80 белых беспородных крысах-самцах массой 220-250г, полученных из вивария ФГБОУ ВО «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки» МЗ РФ, в осенне-зимний период в лаборатории кафедры фундаментальной и клинической фармакологии с естественным режимом освещения. Животные распределялись на интактную и 9 экспериментальных групп по 8 особей. Крысы, находившиеся в первых четырех группах (референтные) получали индометацин в дозе 7 мг/кг, нимесулид в дозе 5 мг/кг, кислоту ацетилсалициловую и парацетамол в дозе 50 мг/кг однократно в сутки на протяжении 2х недель. Пять последних групп (опытные) получали оригинальные вновь синтезированные производные цианотиоацетамида с наиболее выраженной анальгетической активностью, которые им вводили в виде водной взвеси через желудочный зонд.  Дизайн составлен в соответствии с руководством по доклиническим исследованиям. 

Их структура и химическое строение представлены на рисунке 1.

 

d02-123

5-cyano-N-(2,4-dichlorophenyl)-4-(2-furyl)-2-methyl-6-[(2-oxo-2-{[3-(trifluoromethyl) phenyl]amino}ethyl)thio]-1,4-dihydropyridine-3-carboxamide

 

d02-133

5-cyano-N-(2,4-dichlorophenyl)-4-(2-furyl)-2-methyl-6-({2-[(3-methylphenyl) amino]-2-oxoethyl} thio)-1,4-dihydropyridine-3-carboxamide

 

d02-139

5-cyano-N-(2,4-dichlorophenyl)-4-(2-furyl)-6-({2-[(4-methoxyphenyl) amino]-2-oxoethyl} thio)-2-methyl-1,4-dihydropyridine-3-carboxamide

 

d02-172

5-cyano-N-(2,4-dichlorophenyl)-6-({2-[(2-ethoxyphenyl) amino]-2-oxoethyl} thio)-4-(2-furyl)-2-methyl-1,4-dihydropyridine-3-carboxamide

 

d02-149

6-[(2-anilino-2-oxoethyl) thio]-5-cyano-N-(2,4-dichlorophenyl)-4-(2-furyl)-2-methyl-1,4-dihydropyridine-3-carboxamide

Рис. 1. Химические формулы исследуемых производных цианотиоацетамида.

В проведенном эксперименте группы состояли из 8 особей. Новые гетероциклические соединения вводились в дозе 5мг/кг один раз в день, в течение 14-х суток крысам, которые был лишены пищи за 16 часов до опыта. После чего, на 15 день, осуществлялся забой.

За животными всех групп осуществлялся визуальный мониторинг поведенческой активности, аппетита, жажды, состояния шерстяного покрова. После окончания эксперимента был произведен забор крови из бедренной вены.  Стандартными методиками на спектрофотометре SOLAR PM 2111 определяли уровень щелочной фосфатазы и аланинаминотрансферазы в крови животных всех групп.

Экспериментальные исследования проводились в полном соответствии с приказом №199н Минздрава России от 1 апреля 2016 года (Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практики). На всем протяжении периода исследований лабораторные животные были под наблюдением в условиях свободного доступа к пище и воде, в соответствии с ГОСТ 33044–2014 «Принципы надлежащей лабораторной практики» (утвержден приказом Федерального агентства по техрегулированию и метрологии №1700-ст, от 20 ноября 2014 г.).

Исследование получило одобрение комиссией по биоэтике ФГБОУ ВО «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки», Министерства здравоохранения РФ (Луганск, кв. 50-летия Обороны Луганска, 1Г), протокол №6 от 01.11.2021 г.

Статистический анализ проводился методами непараметрической статистики, вследствие отсутствия нормальности распределения и малого количества наблюдений в каждой группе. Дескриптивный анализ проводился с выявлением медианы (Ме) вариационных рядов. Дисперсионный анализ полученных данных проводился на ресурсе [KruskalWallisTestCalculator] (https://www.statskingdom.com/kruskal-wallis-calculator.html) по методу Крускала-Уоллиса с последующим post-hoc анализом по критерию Данна. Нулевая гипотеза отвергалась при р<0,05 [18, 19].

Полученные результаты и их обсуждение.  Полученные в эксперименте данные биохимических исследований по уровню щелочной фосфатазы в крови крыс отражены рисунке 2 и данные аланинаминотрансферазы в рисунке 3. При сравнении средних значений показателя щелочной фосфатазы у крыс референтных групп с таковыми у интактных крыс выявлены большие изменения в группах животных, которым вводили нимесулид и парацетамол. При сравнении средних значений аланинаминотрансферазы установлены наиболее выраженные изменения после хронического применения парацетамола.

Так, значение щелочной фосфатазы в крови крыс, которые через желудочный зонд получали нимесулид в течение двух недель, возрастает на 144% в сравнении со значениями у интактных животных. Введение парацетамола в эксперименте привело к увеличению щелочной фосфатазы на 139% в сравнении с интактными крысами.

Сравнивая содержание аминотрансферазы в сыворотке крови после приема парацетамола, ее уровень в сравнении и интактными крысами возрос на 118%.

Рис. 2. Содержание щелочной фосфатазы (мкмоль/л) в сыворотке крови

Рис. 3. Содержание аланинаминотрансферазы (мкмоль/л) в сыворотке крови

 

Наиболее выраженное влияние на уровень аланинаминотрансферазы оказал новый образец - гетероциклическое соединение с шифром d02-149, поскольку его хроническое действие привело увеличению показателя на 131% в сравнении с интактными значениями (см. табл.).

Таблица 1 –  Активность аланинаминотрансферазы(Е/мл) в сыворотке крови

Группы животных

Хср

Me

S

V,%

*p-критерий

Интактная х1

14,0

14,2

1,98

14,1

0,83

Индометацин х2

15,9

16,0

1,63

10,2

0,86

Парацетамол х3

18,2

17,5

5,01

27,5

0,24

АСК х4

13,5

14,0

2,05

15,2

0,13

Нимесулид х5

18,9

20,4

5,03

26,6

0,24

do-123 х6

13,0

13,1

1,34

10,3

0,57

do-133 х7

16,4

17,8

4,34

26,4

0,22

do-139 х8

13,8

13,5

1,63

11,8

0,90

do-149 х9

20,8

20,0

3,46

16,6

0,27

do-172 х10

17,0

15,9

4,48

26,3

0,46

*если р-критерий больше уровня значимости α = 0.05, то распределение является нормальным.

Животные, получавшие в эксперименте соединение с шифром d02-123 не имели достоверных различий с таковыми у интактных крыс по уровню щелочной фосфатазы и аланинаминотрансферазы в крови. У них не обнаружены признаки их гепатотоксичности в хроническом эксперименте.

Выводы. Из исследуемых пяти новых оригинальных производных цианотиоацетамида с выраженными болеутоляющими свойствами, вводимых ежедневно внутригастрально в течение 14 суток в дозе 5 мг/кг, наиболее безопасными в плане воздействия на функционирование печени по показателю щелочной фосфатазы и аланинаминотрансферазы является соединение с лабораторным шифром d02-123.

У крыс, получавших новые производные цианотиоацетамида с анальгетической активностью на протяжении 2 недель с шифром d02-149, в биохимическом анализе крови выявлен высокий уровень щелочной фосфатазы и алинанаминотрансферазы что свидетельствует о его гепатоксичности. Полученные данные представляют практический интерес в контексте доклинических исследований новых высокоэффективных и безопасных лекарственных средств.

×

About the authors

Elena Bibik

ФГБОУ ВО ЛГМУ им. Святителя Луки Минздрава России

Author for correspondence.
Email: helen_bibik@mail.ru

д.м.н., профессор, зав. каф. фундаментальной и клинической фармакологии

Russian Federation, Луганская Народная Республика, г.о. Луганский, г. Луганск, кв-л 50-летия обороны Луганска, д. 1г

Sergei Krivokolysko

ФГБОУ ВО «Луганский государственный университет им. Владимира Даля»

Email: ksg-group-lugansk@mail.ru

д.х.н., профессор зав.каф. химии и инновационных химических технологий

Russian Federation, г. Луганск, кв. Молодежный, 20а

Daria Bukhtoyarova

ФГБОУ ВО «Луганский государственный медицинский университет имени Святителя Луки»

Email: darya.rupengey.00@mail.ru

студентка

Russian Federation, Луганская Народная Республика, г.о. Луганский, г. Луганск, кв-л 50-летия обороны Луганска, д. 1г

References

  1. Бибик, Е. Ю. Исследование новых производных 1, 4-дигидропиридина как потенциальных средств с болеутоляющей активностью в тесте орофациальной тригеминальной боли: экспериментальное доклиническое рандомизированное исследование / Е. Ю. Бибик, И. С. Олейник, А. А. Панков [и др.]. // Кубанский научный медицинский вестник. – 2023. – Т. 30, №. 2. – С. 64-75.
  2. Гайдукова, И.З., Мазуров В.И. Эффективность нестероидных противовоспалительных препаратов / Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. 2019;119(5): 134‑140.
  3. Дроздов, В. Н. НПВП-повреждения желудочно-кишечного тракта: новые возможности профилактики гастро- и энтеропатий / В. Н Дроздов, Ю. В. Мещеряков, С. Ю. Сереброва [и др.]. // Медицинский совет. – 2019. – № 21. – С. 158-166.
  4. Рациональное применение НПВП – баланс эффективности и безопасности (обзор литературы) / Журавлева, М.В., Кукес В.Г., Прокофьев А.Б., Сереброва С.Ю., Городецкая Г.И., Бердникова Н.Г. // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. – 2016. – № 6-4. – С. 687-696.
  5. Каратеев А.Е., Насонов Е.Л., Ивашкин В.Т. и др. Рациональное использование нестероидных противовоспалительных препаратов. Клинические рекомендации. Научно-практическая ревматология. 2018; 56 (Прил. 1):1-29.
  6. Конакова, А. В. Последствия чрезмерного приема нестероидных противовоспалительных препаратов / А. В. Конакова, К. А. Кушакова // Инновации. Наука. Образование. – 2021. – № 46. – С. 2182-2187.
  7. Кукеса, В. Г. Клиническая фармакология нестероидных противовоспалительных средств / Под редакцией Ю.Д. Игнатова, В.Г. Кукеса, В.И. Мазурова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. – 262 c.
  8. Пахомова, И.Г., Павлова Е.Ю. Нестероидные противовоспалительные средства: фокус на безопасность при выборе препарата // Consilium medicum. Неврология (прилож.). 2014. № 1. С. 30-34.
  9. Ребров, А. П. Боль, нестероидные противовоспалительные препараты и хроническая болезнь почек: непростые взаимоотношения /Южно-Российский журнал терапевтической практики. -2022;3(2):25-31.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies