USE OF METHOD OF EMPIRICAL SELECTION OF PHARMACOTHERAPY IN CASE OF VAGINAL BIOCENOSIS DISORDERS WITH THE HELP OF PH-MEASUREMENT OF EXCRETIONS

Abstract


Несмотря на значительное количество методов для диагностики степени нарушения влагалищной микробиоты и подбора оптимальной фармакотерапии, применение этих методов достаточно ограниченно. Ограниченность использования обусловлена проблематичностью использования в массовом масштабе методов диагностики, не включенных в стандарты ОМС, а также тем фактом, что для многих групп пациенток достаточно применения скрининговых методик. Базовой скрининговой методикой является pH-метрия. Эффективность данного метода определяется использованием индикатора, реагирующего на изменение рН в необходимомдиапазоне. Статья посвящена возможности использования индикатора метилового красного для оптимизации подбора фармакотерапии у женщин с нарушением биоценоза влагалища. Предложены методика приготовления раствора индикатора для использования в качестве экспресс-диагностикума.

Актуальность. В настоящее время разработано множество возможностей для диагностики степени нарушения влагалищной микробиоты и подбора оптимальной фармакотерапии [2, 6]. Однако имеется целый ряд ограничений для применения этих методик. Во-первых, в условиях современного российского здравоохранения проблематично использовать в массовом масштабе методы диагностики, не включенные в стандарты ОМС, а значит, не оплачиваемые страховой медициной. Во-вторых, существует целый ряд клинических ситуаций, когда такое углубленное обследование, направленное на идентификацию возбудителя, не требуется. К числу последних относится обследование женщин в позднем репродуктивном, перименопаузальном и менопаузальном периодах, а также женщин более молодого возраста, не планирующих беременность и роды. Этим пациенткам для назначения эмпирической фармакотерапии достаточно применения скрининговых методик [5,7, 9]. В последнее время для проведения экспресс-диагностики перед назначением эмпирической фармакотерапии все большую популярность приобретают методы, основанные на определении рН влагалищных выделений [2, 6]. Нормальный рН влагалища - величина постоянная, колеблется в пределах 3.8 - 4.6и определяется особенностями влагалищной микрофлоры. Нормальная микробиота представлена в основном лактобациллами (концентрация их - не менее 107), вырабатывающими молочную кислоту, которая и создает кислую среду. Если количество лактобацилл повышается, то кислотность выделений также усиливается, формируется так называемый цитолитический тип среды. В большинстве случаев при развитии патологической микрофлоры кислотность влагалища уменьшается, вплоть до развития нейтральной или даже щелочной среды. Так проявляют себя грибы рода Candida, трихомонады, гарднереллы, неспецифические аэробы и анаэробы. Для каждого из этих возбудителей характерен свой уровень повышения рН влагалища. Таким образом, точно измерив кислотность влагалищных выделений, можно ориентировочно определить характер изменений влагалищной микробиоты и назначить соответствующую фармакотерапию. Кроме того, хочется подчеркнуть, что даже у пациенток, активно использующих современные диагностические возможности для постановки диагноза, pH-метрия часто используется как промежуточный этап контроля качества лечения. На фоне лечения по мере восстановления микрофлоры кислотность влагалища постепенно нормализуется. Определение рН на уровне 4,0-4,4 в течение 4-х недель после окончания лечения - маркер восстановления влагалищного биоценоза [1,3] pH-метрия является общедоступным, простым в использовании методом, для ее проведения не требуется специального оборудования, ее можно проводить в кабинете акушера-гинеколога с выделениями, взятыми на поверхность влагалищного зеркала или на предметном стекле. Также хочется подчеркнуть низкую себестоимость этого метода. Основным фактором, определяющим эффективность рН-метрии, является качественный индикатор. Он должен быть высокочувствительным, реагировать на незначительные изменения рН среды. Кроме того, в случае непосредственного контакта с телом пациентки индикатор должен быть нетоксичным и гипоаллергенным [4]. Поэтому совершенствование методик экспресс-диагностики заболеваний нижнего отдела репродуктивного тракта женщины в настоящее время направлено, в основном, на поиск индикатора, удовлетворяющего вышеназванным условиям. Материал и методы исследования. В работе были использованы следующие реактивы: метиловый красный (ч.д.а.); этиловый спирт - 95% (х.ч.); глицерин (ч.д.а.), буферные растворы: стандарт-титры для приготовления буферных растворов - рабочих эталонов рН 3-го разряда СТ-рН-04.3. (состав фиксаналов приведён в [8]). В соответствии с ГОСТ 4919.1-77 «Реактивы и особо чистые вещества. Методы приготовления растворов индикаторов» был приготовлен индикатор сравнения (эталон) по следующей методике: 0,01 г метилового красногорастворяли в 10 мл этилового спирта. В связи с тем, что предварительные эксперименты продемонстрировали, что метиловый красный не растворим в глицерине, методика приготовления экспериментального раствора была изменена следующим образом:0,05 г метилового красного растворяли в 2 мл этилового спирта, затем доводили глицерином до общего объема 10 мл; Далее было взято 0,5 мл (10 капель) индикатора (эталон), в которые постепенно добавлялись растворы с рН=4,01, 5,0 и 6,86 до изменения окраски индикатора. Аналогичные эксперименты были проведены с экспериментальным раствором индикатора. Полученные результаты и их обсуждение. В работе исследовали возможность приготовления раствора метилового красного в глицерине и изменение окраски индикатора в этом растворе при различных рН. Метиловый красный (метилрот, диметил аминазо бензолкарбоновая кислота) - основной кислотно-щелочной индикатор сточкой перехода рН4,2 -6,3; в кислой среде - красный, в щелочной-желтый [10]. Проба с метиловым красным широко применяется в бактериологии для дифференциации некоторых видов энтеробактерий. При приготовлении раствора индикатора в соответствии с ГОСТ 4919.1-77 (эталон) наблюдалось хорошее растворение индикатора, полученный раствор имел оранжевый цвет. При приготовлении раствора индикатора в этиловом спирте (2 мл) и последующем доведении раствора глицерином до 10 мл цвет раствора был малиново-красным. В первом эксперименте к 10 каплям индикатора (эталон) постепенно добавлялись растворы с рН=4,01, 5; и 6,86 до изменения окраски индикатора. Уже при добавлении 2 капель раствора с pH=4.01 окраска раствора менялась на ярко-красную, последующее увеличение объема добавляемого раствора приводило к появлению малиновой окраски. При добавлении 5 капель раствора с рН=5 окраска раствора становилась оранжевой и не менялась при дальнейшем увеличении объёма добавляемого раствора. При добавлении уже 5 капель буферного раствора с pH=6,86 цвет индикатора резко изменялся с оранжевого на желтый, а при дальнейшем добавлении буферного раствора с pH=6,86 цвет становился светло-желтым. В дальнейших экспериментах к 5 каплям экспериментального раствора индикатора добавляли растворы с различным рН до изменения окраски индикатора. Также проводилось сравнение окраски экспериментального раствора индикатора, с эталоном сравнения. Для экспериментального раствора индикатора добавление 10 капель раствора с pH=4.01 изменяло окраску на ярко-малиновую, дальнейшее добавление раствора с pH=4.01 приводило к появлению светло-малиновой окраски, вызванной разбавлением раствора. При добавлении 5 капель раствора с рН=5 окраска раствора становилась насыщенно оранжевой, при дальнейшем увеличении объёма добавляемого раствора оранжевый цвет становился менее интенсивным. Изменение цвета при добавлении буферного раствора с рН=6,86появлялось уже после добавления двух капель раствора - цвет становился оранжево-желтым. При дальнейшем добавлении раствора с рН=6,86 цвет раствора оставался оранжево-желтым и лишь становился светлее вследствие разбавления. Полученные растворы имели идентичную окраску при добавлении 30 капель раствора с рН=6,86 к эталонному индикатору и раствору индикатора в глицерине. Выводы. Для эмпирического подбора фармакотерапии и промежуточного контроля качества лечения нарушений биоценоза влагалища может быть использован метод рН-метрии влагалищных выделений с чувствительным индикатором. Метиловый красный является в целом походящим индикатором для динамического контроля за изменением рН влагалищных выделений. Метиловый красный, растворенный в спирте с последующим доведением раствора глицерином, достаточно чувствителен к изменению рН. Достаточная чувствительность раствора метилового красного в требуемом интервале рН позволяет рекомендовать индикатор для дальнейших исследований.

N V Khoroshikh

Voronezh State Medical University

Yu Yu Madykin

Voronezh State Medical University

V O Mittova

Voronezh State Medical University

A A Soloveva

Voronezh State University

  1. O’Hanlon D. E., Vaginal pH measured in vivo: lactobacilli determine pH and lactic acid concentration/ D.E. O’Hanlon , R.A. Come,T.R. Moench //BMC Microbiology. - 2019. - Vol. 19. - P. 13-24.
  2. Акушерство и гинекология. Дифференциальная диагностика от А до Я: пер. с англ./ под ред. Н.М.Подзолковой.- Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 400 с.
  3. Гинекология. Национальное руководство. Краткое издание / под ред. Г.М. Савельева, Г. Т. Сухих, И. Б. Манухина. - Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2017.- 704 с.
  4. Единые санитарно-эпидемиологические и гигиенические требования к товарам, подлежащим санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю). Решение Комиссии Таможенного союзаю -28.05.2010 № 299. -URL: https://www.alta.ru/tamdoc/10sr0299 (дата обращения 24.02.2019)
  5. Совершенствованные подходы в лечении осложненного бактериального вагиноза и вульвовагинального кандидоза / А.Н. Стрижаков [и др.]//Акушерство и гинекология. - 2018.-N 12.-С.142-148. 6. RanjitE., Prevalence of bacterial vaginosis and its association with risk factors among nonpregnant women: a hospital based stud / E. Ranjit [et al.] //International Journal of Microbiology. - 2018. - ID 8349601 (дата обращения 20.02.2019).
  6. Рациональная фармакотерапия в акушерстве, гинекологии и неонатологии: руководство для практикующих врачей. /од общ. ред. В. Н. Серова, Г. Т. Сухих. - 2-е изд., Москва : Литтерра, 2014. - 736 с.
  7. Шефер К. Лекарственная терапия в период беременности и лактации /под ред. К. Шефер, Х. Шпильманн, К. Феттер. - Москва : Логосфера, 2010. -768 с.
  8. Sabnis R.W. HandbookofAcid-BaseIndicators /R.W. Sabnis. - NewYork: CRCPress,2007. -416 p.

Views

Abstract - 2

PDF (Russian) - 0

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies